傅F08W
把尿酸钠用氧氧化钠配成浓度为20mg/ml的溶液,放在冰箱冷冻里保存,每次用的之前,在37℃水浴中加热30分钟,在给他点震荡一下,在配成100、200、300、400、500、600ug/ml,加到铺好细胞的96孔板上。第一次做造模浓度在300-400之间,第二次摸的时候300-400之前的细胞都快死光了,第三次摸浓度到500了,细胞破碎的都很少,第四次摸500的破碎了很多,但600的细胞活性比500的还要高。不知道哪一步有问题,想请有经验的老师或者同学指点一下
z流沙z
试剂配好后分装保存,如果近期频繁使用,暂放4°,避免反复冻融
毛利小五郎的徒弟
可以考虑加一组550的浓度看一下生长情况,如果比500好的话考虑这个浓度比较合适
loveliufudan
可能是尿酸钠在制备过程中受到了氧化,导致浓度不稳定,以及在制备浓度较高的溶液时,对细胞造成了细胞毒性,导致细胞活性下降。具体可能存在以下问题:
溶液制备过程中受到氧化影响。氧氧化钠具有强氧化性,在制备尿酸钠溶液时需要小心操作,避免氧化反应影响尿酸钠的稳定性。可以尝试使用其他方法制备尿酸钠溶液,或者使用已经稳定的尿酸钠溶液。
溶液浓度不均匀。您制备的尿酸钠溶液是浓度为20mg/ml,可能存在浓度不均匀的问题,导致对细胞造成不同程度的毒性。可以尝试在制备时进行充分搅拌,或使用其他浓度的尿酸钠溶液。
细胞摸种时浓度过高。您在细胞摸种时使用的浓度较高,可能对细胞造成了毒性。可以尝试降低摸种时的浓度,或者使用其他方式进行摸种。