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如何在体外检测小鼠IL-2活性,急

相关实验:🔥 原代细胞培养实验

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dxy_oaw0plor

实验室没人做过这个,也没怎么找到相关文献,请问有大佬做过吗?

我是制了一种药,它里面包含IL-2,老师让测一下它的含量和活性,我目前用ELISA测了含量,挺高的,70ug/ml。

但是活性的话,就不知道怎么做了。以下是我网上找到的实验方案:

1)把致死的小鼠按照常规的方法进行制备5×106/ml的脾细胞悬液, 并且加入ConA2500g/ml, 放在25ml的细胞培养瓶中进行培养96h, 并且要用10mg/ml的甲基甘露糖的Hanks液清洗两次,用含有10%的胎牛血清的RPMI-1640培养液进行清洗一次,把细胞的浓度调节为1000000/ml, 为测定细胞的反应靶细胞。

2)将用ConA活化的小鼠脾淋巴细胞以5000个细胞每孔的细胞密度接种到96孔板中,并添加不同浓度的OMV-mIL2。孵育48h后,用倒置显微镜观察细胞,用CCK-8细胞计数试剂盒(cell Counting Kit-8)检测细胞增殖情况。

求大佬帮忙看看,该如何设计实验,比如实验的靶细胞就提取小鼠的脾脏得到悬液吗?然后用药物孵育看增殖效果?

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