细胞侵袭实验

那些一坨一坨的东西是死细胞，细胞穿不过去饿死了。可能是因为小室底下有气泡，接触不到下室的培养基。

有几个原因，一个是可能你的Matrigel的浓度用的有点大了，可以参考文献中别人做你这个细胞时一般用的多少浓度，有的细胞侵袭能力不是很强，浓度大了就过不去，如果没有人做过就只好自己做梯度了；二是培养时间不够，我将从10h－48h的都有，不同的细胞时间会有所不同；三是其实是过去了，你没有看到？这个实验做完后是要染色的，不知你有没有做这一步？一般用结晶紫染效果会好一些，染色后把没有穿过的细胞擦掉，再观察穿过膜的细胞。四是有些细胞本身是没有侵袭力或者侵袭力非常若，即使是肿瘤细胞。建议用酶谱法检测一下MMP-2的活性，或者加用PGE2等明确可以增强侵袭力的药物处理一下。排除细胞本身的原因。这一点很重要，而往往被大家忽视。五是多重复几次。我有时候用同样的条件，就是没细胞穿过去。

其实，你可以看看下层的well里面有漏过去的细胞了没有，如果有，就取出weill染色，看看穿过去了没有，这样很难看出来的