用红细胞裂解液裂解人外周血红细胞，离心后没有白色沉淀

我做的是外周血的T淋巴细胞分型，主要是检测th1/th2/th17等亚型。需要裂红后固定染色。

我用的是400ul的血，加入刺激剂后，培养箱刺激5小时，拿出来加入4ml 1×红裂液，冰上裂解15min，然后450g离心10min。正常离心完我应该能看到管底白色的白细胞沉淀，但是却看不着，这是为什么？我之前试过先裂红，再刺激，裂红的时候的确能看到下面的白色沉淀，但是裂红后，刺激5小时之后，在用fbs洗的时候，白色沉淀变成白色的膜一样的东西，用枪头吹打不开。这又是为啥？

问题：全血和红细胞裂解液的比例到底怎么配呀，裂红在一个什么条件下合适呢？裂红后离心条件呢？