【求助】红细胞裂解液
丁香园论坛
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有没有红细胞裂解液的配方？本人试了碧云天的红细胞裂解液，效果不大好，请高人指点！
http://baike.baidu.com/view/2601370.htm
http://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.html
COMPOSITION AND COMPONENT DATA
Prepared or working solution, sterile 0.85% ammonium chloride in phosphate buffered saline
http://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.html
COMPOSITION AND COMPONENT DATA
Prepared or working solution, sterile 0.85% ammonium chloride in phosphate buffered saline
红细胞裂解液（0.15MNH4Cl，10.0mMKHCO3，0.1mMNa2EDTA，滤器过滤灭菌）
可见不同公司的裂解液存在差异，不过基本都含有0.15MNH4Cl。
渗透压应该是个关键因素。
渗透压应该是个关键因素。
呵呵，我们就用自制的，一般加2ml灭菌双蒸水，震荡15-30s（视情况而定），加2ml undefinedPBS再加适量undefinedPBS
配制试剂所需材料：
1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate
Solution
a) NH4Cl (1.5 M) 80 g
b)
KHCO3 (100 nM) 10 g
c) Na4EDTA (10
nM) 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N
HCl or 1N NaOH（调节pH值用）
配制步骤：
1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml
去离子水中；
2.调节溶液pH值到7.2-7.4，加去离子水定容到1000ml；
3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：
1.10x
储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；
2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
以上配方可以在自己的实验室配制后先做预备实验以了解其裂解情况，如裂解不充分或不好，建议购买BD公司、BioLegend公司、Caltag公司、Jingmei公司等商品化溶血素，可以得到更好的裂解效果。
1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate
Solution
a) NH4Cl (1.5 M) 80 g
b)
KHCO3 (100 nM) 10 g
c) Na4EDTA (10
nM) 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N
HCl or 1N NaOH（调节pH值用）
配制步骤：
1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml
去离子水中；
2.调节溶液pH值到7.2-7.4，加去离子水定容到1000ml；
3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：
1.10x
储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；
2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
以上配方可以在自己的实验室配制后先做预备实验以了解其裂解情况，如裂解不充分或不好，建议购买BD公司、BioLegend公司、Caltag公司、Jingmei公司等商品化溶血素，可以得到更好的裂解效果。
红细胞裂解液（Tris-NH4Cl）：称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷（Tris）1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后，混匀静止4-5分钟，待红细胞完全破碎，1000r/min离心5分钟，弃上清去除红细胞，得到白细胞沉淀。
碳酸氢钾（KHCO3）1.0g；氯化氨（NH4CL）8.3g；EDTA-Na2
0.037g，加双蒸水至1000ml，即工作液。（该配方出自《实用流式细胞术彩色图谱》）
0.037g，加双蒸水至1000ml，即工作液。（该配方出自《实用流式细胞术彩色图谱》）
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