DXY泡沫呀
组织蛋白含血量太多了影响后续实验,怎样在裂解组织前应用红细胞裂解液呢?是把组织剪碎后用红细胞裂解液吗?
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新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液, 再加入红细胞裂解液
府宅
应在组织剪碎后用红细胞裂解液,这样反应更充分
丁香清香
最好的方法是样品取样时将组织做灌注处理,如果没有做,可以将组织匀浆后与红细胞裂解液混合,离心去除上清,就可以·解决红细胞问题
未来9
可以把组织先用红细胞裂解液裂解掉红细胞,再用PBS清洗,可以换用柱式法提取总蛋白。
天一湖医者
1.新鲜抗凝血,离心弃去上清液;
2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液),轻轻吹打混匀;
3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;
4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;
5.如裂解不完全可重复步骤2和3;
6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。