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真核生物表达,验证质粒连接目的基因问题

相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

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idiotOC0P

想请问一下,目的基因连接毕赤酵母的表达质粒载体后,验证是否成功连接,需要用引物与单菌落进行PCR。这个引物是怎么选择呢,通用引物还是特异性引物?特异性引物的话怎么设计呢?谢谢各位

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1 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

你用的是哪一种毕赤酵母菌株。毕赤酵母宿主菌常用的菌株类型有四种,分别是X33、 GS115 、 KM71H 、 SMD116。GS115 菌株具有 AOX1 基因,属于 Mut+ ,指的是甲醇利用正常型; KM71 H 菌株的 AOX1 位点被 ARG4 基因插入,属于 Muts ,指甲醇利用缓慢型,两种菌株都适用于一般的酵母转化方法 。不同的菌株验证方法也不一样。

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