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碧云天核蛋白提取试剂盒提取后为什么跑wbnrf2蛋白无条单laminb也没有?

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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slslkm

用碧云天试剂盒提取核蛋白bca也做了浓度可以最后配成每孔15ul蛋白结果wb无任何条带

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3 个回答

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cxsm

有帮助

出问题的步骤太多了,不知道你全蛋白里面有没有显出Laminb? 其他的质指标正常吗?

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bamboopiggy

有帮助

1.你跑whol lysit的对照了么?对照有条带吗?2.这俩抗体你以前用过吗?切的位置对不?二抗有没有用错?现在提核的技术很稳定,碧云天的盒子应该可以用,不行的话,你买个thermo的盒子试试。那个我用过,没问题的

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天一湖医者

有帮助

首先要采集足量的样本进行裂解;其次要保持低温操作,并且裂解液中可加入一定浓度的蛋白酶抑制剂,抑制蛋白酶活性,防止靶标蛋白被降解;另外不同蛋白提取方法不同,不同强度裂解液裂解程度有差异,蛋白得率有差别,对于膜蛋白和核蛋白提取,建议进一步超声处理样本,让样本裂解更充分;

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