丁香粉猪猪
抗体是不是回收重复利用的?重复利用的抗体效价会降低。
2.样品是不是放的时间长了?蛋白有些降解,建议重新取样。若不是,可以用以前的样品做个阳性对照。看是否也是这样。
3.杂一抗前用5%的脱脂奶粉封闭30min,可以降低背景和杂带。
dxywode
过程应该是没有问题的,可能是抗体的问题,如果非特异性条带太多了可以给P掉,只要不影响你结果就可以了。
万千490
如果抗体没有问题,且已经封闭了的话,那最有可能就是蛋白降解了。你再提一次试试,蛋白保存在什么条件下的也要追溯一下
whilt-shirt
不推荐,建议重新跑一遍,如果还是这样就只能这么用了
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