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泛素化检测的免疫共沉淀怎么看

相关实验:蛋白质泛素化分析

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努力追赶的科研人

TRABID可降低VPS34 k29/k48泛素化

完全看不懂,为什么有四组,wt和cs代表什么,Ip是免疫共沉淀,Lysate代表什么,是阳性对照吗?为什么会有His-Ub,求助帖--文献小白的苦恼,去网上搜也不是特别清楚

 
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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

WT和CS是两种不同的样品,可能是不同条件下的实验组和对照组。

IP代表免疫共沉淀实验,是用来检测蛋白质相互作用的一种方法。在这个实验中,V5-TRABID是用来“鱼”Flag-VPS34的。

Lysate是细胞裂解液,代表实验样品。

His-Ub可能是用来标记Ubiquitin的,Ubiquitin是一个重要的信号分子,它可以和目的蛋白发生共价结合,形成泛素化修饰。His可能是Histidine的缩写,是一种常用的蛋白质标签。

Flag-VPS34、V5-TRABID、Flag-TRABID是不同蛋白质的标记,代表三种蛋白质。

g55、Tubulin是WB中用来检测载体的蛋白质,Actin可能是内参,用来检测实验条件的稳定性。

从图中可以看出,V5-TRABID与Flag-VPS34发生了免疫共沉淀,并且TRABID可以降低VPS34的泛素化修饰,因为IP中的His-Ub明显比Lysate中的要强。

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balalaLy

有帮助

lysate就跟input一样,是总的蛋白裂解液。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

Ip是免疫共沉淀,Lysate代表阳性对照。

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