求教泛素化实验

1.转染HA-Ub过表达质粒的目的是为了增加细胞中Ubiquitin的水平，使其可以更好地配对泛素化蛋白，从而可以提高实验效果。不一定所有的泛素化实验都需要转染HA-Ub过表达质粒，但是如果需要快速检测某个蛋白的泛素化变化情况，那么这种方法是很有效的。

2.直接用蛋白A抗体做WB并不能很好地证明蛋白A的泛素化情况，因为泛素化蛋白和未泛素化蛋白的外观是一样的。因此，需要先加入HA-tag抗体，证明蛋白A是否已经泛素化，然后再进行WB检测。