丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

求教:2100bpPCR引物设计和实验方案

丁香园论坛

1078
列位大虾:
我是新手。准备扩增细菌基因的2100bp的基因序列,然后克隆、测序、
E.coli表达,纯化,再做多克隆抗体。我用primer软件自己设计引物,总是有错配和二聚体,不知道该怎样设计引物?
还有这么长的片段如果P出来后该选用哪一种质粒载体?根据什么选?
测序用什么载体?
基因序列:ATGACATTTGAAAAGCAAAAACACTTTAGTTTACGTAAACTAAAATTTGG
TTTAGTTTCAGTTGCGATCATAGCTTTCTTATTTGCTGTAACAAAGACTG
CAGAAGCTGACGAGACAGTGATAACTGAACAAAGGCAAACAAGTAAGATT
AACGCTAGTTCTCAAAAAGTGGAGAATCAGACTTCAAATCAGGTGGAAGC
AAAAACGGATAGTGCAAACAAGGATCCTCAAGAAAAAACAGGAAGTGTTG
CAACTGATGCCCCTTCAATGAATTCAGCTAATAATATGAGTCAGTCTGAC
AAACAAAATACTGTTAATGAAATATCTTCAGATAGTCAGCAAACAAAAAC
AGATGAACAAACTGATTTACCGCAAAACAGCTTTAAACAACAATCTGCTC
ATGTTAAAATGACTACTGAAGCAGAGAAGACCCCATCACATTCGATTAAT
ACCTTTGTTAATGATGGTAATGGTAATTGGTATTACCTTGGTGCTGATGG
TAGAAATGTTACAGGCAGTCATACGATTGGTGGCAAGACTATGTATTTTG
CTCAAGATGGTAAGCAAGTTAAAGGTGCTTTTGCTCAAGATTCGGATGGA
AATAAACATTATTATGATAGAGATAGTGGTGAGATGTGGACCAATCGCTT
TGTCAATGATCAAGGCAATTGGTATTATCTTAATAATGATGGTGTCCCTG
TCACCGGTAGTATTACTGTCAATGGTCAGTCTCTGTATTTTAATTCGGAT
GGTAGTCAGGTTAAAGGGAATTTTGTTGAAGAAGATGGATCTTTGCGTTA
TTATGATAAAAATTCTGGAGATTTACTGAGAAAGACAAGCCGAACCATTA
ATGGTGTTAACTACCAATTTGATAATGATGGAAATGCAAGGGCGATTGAC
AAAATTGAGGTTGTTAAGACCAGTCTTGTAGTTGATAGTTATGAATTTGG
TCCTTCTGTTTCAAAGATTATTCTTGAGTTCAATCATAAGGTAACTCCTG
CTGTTGTTCATGCTGGTGCAATGGTAACAACTGCTGGAGTTCAAAGAAAA
ATTCTTAATTCTTATGTCTCTAATGCTTCAGGACATGTGGTTTACTTTGA
TAGTAGCCATTATGTGACACTTGAATTAGATATTCCTTATGATCCAAATG
ATAGCAGCCGAAATGCATCACCTTTTATTTTTGACTCAGCAGCCTTTCGT
AATAACTGGGTCAACAGTTATACTGTCAAAGTAGATAATTTGCAGGTGCA
AGCAGATGGTTCTAATAGCAGTCAAATTATCAGTTCAGAGCAAGATGCTA
TCAATAATCGTTTCTTGCCTACAACGGATCGTTTCTCAGAACGTGGTAGT
TATGGTAATTTTAATTATGCCGCCTATCAACCAGAAGCAGCTATTGGCGG
TGAGAAGAATCCATTGATTGTCTGGTTGCATGGTATAGGAGAAGTAGGCA
CTGATATTAATATTCCGCTTCTAGCCAGCAATGTGGCTCGTTTAACGGAA
GATCCTATTCAAAGCCATTTCACTTCTACAGGTAGTGGTGGTCAAAAGGG
AGCCTATGTGCTAGTTCCTCAAAGTTCAATTCCTTGGTCTCAAAATCAAA
CAGCTAGCTTAATGGCGCTCATTAAAGCCTATGTAGCAAGCCATCCAGAC
ATCGATAGCCGACGCATTTATTTGGCAGGTGTTTCTAATGGTGGCGGTAT
GACTCTGGATATGGGAGTCGCTTATCCTAACTATTTTGCAGCCTTAGTTC
CTATTGCTGCTTCCTATAGTAATCAATTAACAGATAATCAGATTACCGCT
GCTGCTTTGAAAGCTCTGAAAGGTCAACCAATGTGGTTGATTCATACACG
AACTGATAAAACAATATCTGCAGATAGTAGTGTTCTACCATTCTATAAAG
AGTTACTTCAAGCTGGCGCACAAAATAAATGGCTTTCCTATTATGAAACT
AATGTTGGTAAACATCACTCTGGAGTCACTTATAACGGTCACTGGTCTTG
GATTTATTTCTTGAATGATCAAGTAACTGGCACTCAAAATACTGATAACG
CCAAGAATTGGTCTGGACTTTCTGGCATGGTTGCGACCAATCCAACCTAT
GGTGGTGATGCTAAGGCTACTGTCAATGGCAGAACTTATAGTAATGTCTT
TGATTGGCTAAATGGTCAGCGAAGAAGG

请指教。谢谢。
提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序