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求助,WB背景黑,条带淡怎么解决

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_ub7ystnr

如题,WB背景黑,条带淡,5%BSA封闭俩小时,一抗四度过夜,二抗室温俩小时,孵一抗二抗后TBST 10min/3次漂洗

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4 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

现在都夏天了,你减少二抗孵育时间看看。我之前也遇到过这种情况。

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bamboopiggy

有帮助

加大抗体浓度,或者上样量,然后洗膜液中用千分之一点五或二的tween 20

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府宅

有帮助

抗体效价不高,用量不足,孵育时间太短,或抗体反复使用保存不当而失活。可考虑更换效价更高的抗体,或提高抗体稀释度,延长抗体孵育时间;若怀疑抗体失活,可用斑点杂交实验确定抗体活性。

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秋秋欣欣

有帮助

一抗浓度太高,或者你可以缩短洗膜时间但是多洗几次

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