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如何选择表达出蛋白的WB抗体?

相关实验:表达蛋白检测实验

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PunctualUW1U

本人小白,表达了一个细菌的调节蛋白,不确定是否为我想要的蛋白,有人建议用WB验证一下,如何选择WB抗体呢?

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6 个回答

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科拜余萌

有帮助

WB实验中使用到的有三种抗体:

一抗、二抗和内参抗体。一抗是唯一针对目标抗原的抗体,可以进行制备也可以购买现货,难度系数较高;二抗直接买就OK,只是需要留意下种属选择;内参抗体必不可少,是WB实验中的质控环节。

WB检测之一抗 一抗制备 如果目的蛋白的现货抗体没有找到,或者都不中意,就需要亲自动手制备了,请公司帮你做也不错哦!自己制备一抗通常情况下可以选小鼠、兔制备多抗或者选小鼠制备单抗,前者省时省钱,后者耗时耗财却各有优缺点。多抗制备出来容易产生杂带,却容易出结果,单抗制备出来能得到单一条带及一张漂亮的WB图片,拿去炫耀下也不错。然而做单抗如果没有强有力的细胞培养、融合、筛选经验,也有各种意想不到的结果。

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lanseyaoj

有帮助

多参考高分及经典的文献,以及大厂家的抗体如cst等

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bamboopiggy

有帮助

确实你表达的蛋白是什么然后去抗体公司的网站上去查,看抗你蛋白的抗体是否有,如果有,是否抗你表达的那个种属,如果抗,就可以买了实验了。

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府宅

有帮助

一些机构,如CiteAb,提供了抗体引用的数据库。许多公司现在提供小包装的抗体,让你大胆尝试,再决定是否购买大包装。这可是个好机会,既能验证抗体是否适合你的实验,又不用担心浪费太多钱。

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

供应商的网站通常列出了抗体的应用以及引用的文献,可以从中选择。

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天一湖医者

有帮助

质量是甄选优质抗体的首要标准。完善的验证数据是抗体选择的必要参考。有效的内参抗体是实验准确的重要凭证!

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