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原核表达蛋白,出现条带大小不对怎么办?

相关实验:表达蛋白检测实验

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PunctualUW1U

使用原核表达系统表达了几个蛋白,其中有一个大小不一样,比理论值kDa小,会有哪些原因呢?

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3 个回答

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未来9

有帮助

通常就是以下两个原因的:一是蛋白本身有问题,另一个就是在实验过程中降解了

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dxy_gwrp7ndq

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原核对密码子的使用有偏性,其tRNA丰度反映了这一偏性。表达含有数个大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白时会受对应的 tRNA丰度的限制而效率不高。tRNA短缺会导致翻译移框、氨基酸错误掺入及翻译提前终止,导致表达的蛋白量偏小

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bamboopiggy

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1.看质粒是否有问题。2.你表达的蛋白带不带剪切位点,分泌出来会剪切掉一块

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