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看不到自己目的蛋白处有增高的趋势?

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实验小助理静静

做过表达处理,目的基因后面加了一个Flag标签,但通过WB发现曝出来有很多杂带,但实验室的其他人也是用Flag标签抗体去曝,就很干净。看不到自己目的蛋白处有增高的趋势。求大神指教!!!!!

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3 个回答

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汤姆卜丽波

有帮助

你是合成重组质粒然后转到细胞里的么,质粒测序了么,FLAG标签确定加上了么?如果确定加上了,那有可能是转染,后面一系列操作,一步一步看,都确定没问题了就只能重跑了

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bamboopiggy

有帮助

先去看你过表达的质粒是否正确,尤其是和flag是否做成融合基因了。估计就是你的flag不表达,所以背景中的杂带都出来了。

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whilt-shirt

有帮助

你可以重新加FLAG试试,杂带多是不能用的

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