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科研学霸天团,48小时有问必答
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为什么LPS和干扰素伽马诱导的巨噬细胞白介素10水平最高啊
毛利小五郎的徒弟
考虑是干扰素伽马的浓度不够,所以elisa测得白介素组是lps的高,建议提高干扰素诱导浓度后再做elisa
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问
蛋白质序列,红色字体是什么意思?谢谢
sswei
红色字体意思是剩余重叠切片位点
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问
肺泡灌洗液
huarenqiang5
取肺泡灌洗液后的肺组织能够用于肺组织匀浆检测羟脯氨酸的含量及WB实验。没有什么影响。
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问
免疫诱导的小鼠炎症性肠病模型
毛利小五郎的徒弟
cd3可以介导免疫相关炎症性肠病的发生,pubmed上有许多相关实验,可以查询
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问
tau一直洗不出来是怎么回事啊
huarenqiang5
考虑可能是抗体的特异性低导致的。建议用另外的抗体试试。
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问
实验求助
毛利小五郎的徒弟
还是建议重新跑一遍wb和pcr,如果结果还是同样的那就要考虑实验设计的问题,一般来说pcr结果是比较准确的
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问
wb实验
magicmask
杂志社要求比较严,尽量不要调整
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问
做药物诱导细胞凋亡得实验,有没有可能小剂量药物阻滞G1期,大剂量药物阻滞S期,感谢
dxyc42u
很有可能的,有的药物本来会随剂量发生不同效果
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问
AAV病毒用于细胞实验需要注意哪些问题?
sswei
AAV病毒用于细胞实验关键注意事项1. 启动子的选择。是选择广泛性启动子还是特异性启动子。相比于血清型的组织特异性,特异性启动子可实现细胞的特异性,因此对特异性要求较高的研究,可以选择某种细胞特异性表达的启动子。2. 血清型的选择。AAV的血清型主要由AAV衣壳蛋白的结构所决定,不同的衣壳蛋白结构识别不同的细胞表面受体,因此血清型的选择会影响AAV的感染效率、组织亲和性、和开始表达的时间。3. 病
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问
为何有时病毒在体实验表达效率不理想?
sswei
可能的原因为目的细胞不易感,属于难感染细胞,建议适当加大病毒量再尝试。
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问
AAV病毒应该如何稀释保存?
dxyc42u
AAV病毒用培养液稀释后放四度保存,可以保存一周
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问
AAV注射小鼠,多少病毒量才够呢?
huarenqiang5
根据注射部位的不同而剂量及血清型也不相同:1.肝脏:注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)(人、灵长类);1×10^11 GC/只鼠,稀释成 50-100 μl 进行尾静脉注射。2.心脏和动脉:常用血清型有:AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9 。常见的注射部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。注射病毒滴度为 1.9×10^
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问
用AAV可以实现组织特异性的感染吗?
dxyc42u
AAV一般很难实现组织特异性感染的
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问
哪些实验可以选择AAV病毒?
dxyc42u
一般对于一些难转染细胞的实验选择AAV病毒
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问
AAV注射后如何检测目的基因过表达?
dxyc42u
检测目的基因表达一般选择qpcr或者wb实验
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问
AAV可以通过哪些方法注射到动物体内进行感染?
sswei
AAV动物实验注射方式可分为系统性注射和原位注射两大类。系统性注射中AAV常见的注射方式有尾静脉注射、眶后静脉窦注射、腹腔注射、肌肉注射、面静脉注射、皮内注射等。原位注射也就是局部注射,根据实验需要在不同的部位进行注射,更加适合局部组织的研究。常见的注射方式有脑立体定位注射(神经)、玻璃体注射(眼睛)、心肌注射(心脏)、肝内注射丶肝门静脉注射等,局部注射的优点在于可实现靶组织的特异性感染,且所需的
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问
AAV注射动物后多久可以观察病毒感染效果?
dxyc42u
看情况,有的七八天就看见效果了,有的半个月才能看见效果
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问
腺相关病毒产品的安全性如何?
dxyc42u
只要严格规范操作时很安全的。。
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问
腺相关病毒会整合到细胞基因组上吗?
dxyc42u
腺病毒就是整合到细胞基因组上的
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问
腺病毒可以扩增,会不会比较危险?
dxyc42u
有一定的风险,所以操作时戴两层手套,不要打开通风厨
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