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可能的原因为目的细胞不易感,属于难感染细胞,建议适当加大病毒量再尝试。
土井挞克树
首先,考虑病毒包装制备是否存在问题,比如外源基因是否正确,病毒滴度是否合格等。其次,考虑病毒运输和保存方式是否得当,解冻病毒一定要在冰上进行,尽量避免反复冻融,否则会影响病毒滴度;分装的病毒-4℃可以保存3天,-80℃保存半年以上需要重新测定滴度。
其次细胞良好的生长状态是达到高感染效率的保证,一般选择细胞形态较好、轮廓清晰、处于对数生长期的细胞进行感染可提高感染效率
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生物体内环境复杂,病毒感染细胞后,可能病毒可以很好感染细胞,但收到各种各样体内调控因素的影响,导致病毒携带的外源基因不表达或表达不理想,或表达水平不高。
另外还要考虑组织器官中基因本底表达水平,本底过高的基因要想实现高表达,或本地表达地的基因要实现低表达都可能比较困难。
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