慢病毒敲低后做效应实验的注意事项

慢病毒、细胞

1、应及时开展效应实验；因为慢病毒敲低后，如果培养过长的话，细胞增殖过多，其生长状态会干扰实验结果。

2、稳定株建立好后，可冻存多批代数较早的细胞，做效应实验时使用代数靠前的细胞，且传代次数不宜过多。一方面，细胞传代次数增加会使其理化性质改变，一些基因表型会丢失；另一方面，细胞多次传代后会使得干扰的基因收到代偿机制调节，促使干扰效果下调。

3、若进行免疫相关的研究，建议慢病毒感染的稳定株，传代 2 次，再进行后续的验证实验。因为慢病毒感染细胞，会激活细胞免疫系统，会干扰免疫相关基因。