记得喝水sky
转染48小时后细胞这是死了吗?293t细胞全变黄了,包装的时候该怎么改进啊,转染6小时后补全培和血清,之后就没管它了,48小时就发现变这样了
毛利小五郎的徒弟
变黄是你转染的量太大了,降低病毒载量就好
z流沙z
如果转染质粒量比较大,要求转染时的细胞密度比较高,这样子需要的培养基也比较多
loveliufudan
如果在慢病毒包装过程中出现了全细胞黄化的情况,可能是病毒包装效率太高,导致过量的病毒颗粒释放,感染了所有的细胞。为了避免这种情况,可以尝试以下几种方法:
降低转染病毒的浓度:减少病毒感染细胞的数量,可以降低病毒包装效率和病毒释放量,减少全细胞感染的可能性。
缩短感染时间:减少病毒感染细胞的时间,可以减少病毒包装效率和病毒释放量,从而减少全细胞感染的可能性。
选择合适的MOI:MOI(multiplicity of infection,感染倍数)是指病毒颗粒数与细胞数的比值。可以根据实验需要和细胞类型选择合适的MOI,以达到适当的病毒感染效率,避免全细胞感染。
优化病毒包装条件:可以尝试调整包装细胞的密度、培养时间和病毒包装质粒的用量等条件,优化病毒包装效率和病毒颗粒的释放量。
确认包装的病毒是否是所需要的:在病毒包装之前,最好对病毒包装质粒进行序列鉴定,确保包装的病毒是所需要的,避免浪费时间和资源。