登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
首页
|
实验问答
|
蛋白质
实验问答
15,011,496 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
RIP磁珠和磁力座,如果没有磁力座能完成实验吗
Miracle星
原理是一样的,自己愿意整,没啥问题,不过为了更规范买一个也可以,不过这样弄倒是省钱
4 回答
292 围观
4 回答
292 围观
去回答
问
显像时背景很脏而且marker很浅
Eason老歌迷
如果背景脏,可能是你的封闭时间太短了,可以适当延长,也可能是你的抗体浓度太高。maker在转膜后很清晰,但是孵育完抗体就变淡,我也遇到过,我觉得不影响显影就没事。
4 回答
1018 围观
4 回答
1018 围观
去回答
问
怎样保存2-D凝胶?
dxy1750
4度冰箱保存,可以放2周左右。
4 回答
189 围观
4 回答
189 围观
去回答
问
WB制胶,插梳子后有气泡还能用吗,需要重新配置吗?
sophomore
最好重新配制一块胶,有气泡的要是勉强使用肯定会影响实验结果,条带不会跑出来,更不会很好看。拔梳子不要太快,太猛。
5 回答
1824 围观
5 回答
1824 围观
去回答
问
SDS-PAGE蛋白定量问题?
whilt-shirt
没有用过赛智的软件,一般都是用image j软件分析灰度值
3 回答
288 围观
3 回答
288 围观
去回答
问
蛋白质凝胶电泳的问题?
whilt-shirt
有可能是loding有问题,建议重新换个loding试试
3 回答
372 围观
3 回答
372 围观
去回答
问
同时跑的同样品的内参差别有点大,这是什么问题呀?
dxy_u7ff8bo
其实也是正常的,我经常也跑出来这样。如果是不同的内参,就需要预实验,看哪个内参更稳定,更适合你的样品,就用哪种内参。如果用的是同一种内参,那就需要从电泳本身找原因了,导致这个现象的原因很多,比如电泳液,电级电压,跑胶时间,上样人为误差等,就需要多跑几次摸索一下,一次就满意很难。
5 回答
279 围观
5 回答
279 围观
去回答
问
WB的样品变性后可以在4℃放吗?大概能放多久
bamboopiggy
我放过4度,overnight没问题,估计放一周问题不大
4 回答
9870 围观
4 回答
9870 围观
去回答
问
在做ELISA实验中,最后要显色多久可以加终止液进行终止,显色的原理是什么呀?
bamboopiggy
看你用的kit的说明书,一般在kit给的范围就可以。
3 回答
610 围观
3 回答
610 围观
去回答
问
关于WB灰度值量化为柱状图的疑惑
Eason老歌迷
这两个没啥区别,都可以用。灰度直方图实质就是一个大小为256的数组,数组的下标为0 ~ 255,分别代表了图像采样量化后从0 ~ 255的每个灰度级。计算灰度直方图,其实就是通过遍历图像的每个像素点,统计0 ~ 255的每个灰度级在图像中出现的次数,而统计后的总次数或者归一化后的频率就作为这个数组对应下标的元素取值。
4 回答
5287 围观
4 回答
5287 围观
去回答
问
Elias实验问题寻找?
dxy_082oaia6
如果不是偶然现象每次都这样的话考虑捕获抗体和二抗或者检测抗体可能存在交叉偶然现象可能是所用buffer污染
3 回答
174 围观
3 回答
174 围观
去回答
问
为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到?
Eason老歌迷
质谱不是专一性检测的,而是选择样品中丰度较高的蛋白质优先检测,而丰度较低的蛋白质则因为肽段信号过弱被淹没而不能被检测到。因此,如果样品中待检测的目标蛋白质丰度较低(或者蛋白质分子量较小),即使 WB 能够检测到,质谱并不一定能检测到
3 回答
345 围观
3 回答
345 围观
去回答
问
磷酸化抗体的检测样本制备时是否一定要加NaF等?
bamboopiggy
NaF属于危险品,现在很难买了。一般这样的样品,你可以在lysis里面加点磷酸酶抑制剂。
3 回答
107 围观
3 回答
107 围观
去回答
问
今天跑的wb又歪条带之间也没有分开,是什么原因呢
麻黄连翘赤小豆
歪可能是胶灌的不均匀,没分开可能是跑的时间太短,没跑开
5 回答
1280 围观
5 回答
1280 围观
去回答
问
WB条带总是歪的,加样也很正,不知道什么原因
秋秋欣欣
那可能是你配胶没混匀的问题,没凝好吧
6 回答
1504 围观
6 回答
1504 围观
去回答
问
三色预染蛋白marker是怎么用染料上色的?怎么选择合适的染料呀?求指教?
秋秋欣欣
预染蛋白Marker是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。
3 回答
369 围观
3 回答
369 围观
去回答
问
转膜marker没有全部转过去
balalaLy
用的多少浓度的胶,胶浓度太大也会导致大分子很难转过去
3 回答
1383 围观
3 回答
1383 围观
去回答
问
蛋白泳道黑
麻黄连翘赤小豆
感觉像蛋白降解的问题,重新提蛋白再看看
4 回答
263 围观
4 回答
263 围观
去回答
问
WB实验有关问题
n0y0j7
你的大鼠模型,一抗就是a抗鼠,二抗就是b抗a.一抗是a身上取得,就叫a抗。二抗是b身上取得,叫b抗。常用的是兔抗鼠、羊抗兔组合。人体的标本就是鼠抗人,兔抗鼠。或者兔抗人,羊抗兔。
4 回答
2977 围观
4 回答
2977 围观
去回答
问
【求助】HEPES可以用PBS代替嘛?
东北的雪狼
联系不要用PBS代替,会影响实验结果。
5 回答
952 围观
5 回答
952 围观
去回答
1
•••
105
106
107
108
109
•••
167
跳至
页
提问
扫一扫
实验小助手
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序