显像时背景很脏而且marker很浅
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WB显像时目的条带周围的背景很脏，黑乎乎的。而且marker很淡，融合目的条带和marker的图后marker几乎看不见，上样的时候marker上了5ul，跑出来的胶上marker的条带还是很清晰的，转膜之后肉眼看marker也比较清楚，显像的时候反而很淡，看不清。请问这两个问题是什么原因呢，有什么方法解决没有？多谢各位大佬赐教
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4 个回答
Eason老歌迷
有帮助
如果背景脏，可能是你的封闭时间太短了，可以适当延长，也可能是你的抗体浓度太高。maker在转膜后很清晰，但是孵育完抗体就变淡，我也遇到过，我觉得不影响显影就没事。
whilt-shirt
有帮助
有可能是封闭不完全导致marker被洗掉了
天一湖医者
有帮助
造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。
秋秋欣欣
有帮助
marker很浅可能是因为你Western转膜液里加了sDS 而背景比较脏可能是你没有封闭好或者你的抗体浓度太高
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