显像时背景很脏而且marker很浅

如果背景脏，可能是你的封闭时间太短了，可以适当延长，也可能是你的抗体浓度太高。maker在转膜后很清晰，但是孵育完抗体就变淡，我也遇到过，我觉得不影响显影就没事。

有可能是封闭不完全导致marker被洗掉了

造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。

marker很浅可能是因为你Western转膜液里加了sDS 而背景比较脏可能是你没有封闭好或者你的抗体浓度太高