同时跑的同样品的内参差别有点大，这是什么问题呀？

有可能因为转膜的时候有气泡，膜胶和滤纸之间尽量都把气泡赶出去

同一个样品如果跑成这样，我感觉可能是电泳或者转膜的问题，可能是配胶没配好，可能是转膜的时候没转好。

其实也是正常的，我经常也跑出来这样。如果是不同的内参，就需要预实验，看哪个内参更稳定，更适合你的样品，就用哪种内参。如果用的是同一种内参，那就需要从电泳本身找原因了，导致这个现象的原因很多，比如电泳液，电级电压，跑胶时间，上样人为误差等，就需要多跑几次摸索一下，一次就满意很难。

这种情况有可能是转膜没压紧导致的

有可能是跑胶的问题，也可能是蛋白降解了或者没有溶解好。跑之前55°加热几分钟。