质粒双酶切后无条带，目的基因有条带

相关实验：酶切实验

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dxy_tphcsz00

2023-02-28

抽提质粒浓度为100ng/ul, 跑胶图也有条带，但是过夜12小时双酶切后跑电泳无条带，但是目的基因双酶切后倒是有条带。是跑的时间太长了质粒DNA降解掉了吗

3 个回答

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loveliufudan

2023-03-03

有帮助

过夜12小时后双酶切后质粒DNA没有条带，但是目的基因有条带，这说明质粒DNA在双酶切过程中被消化掉了，而目的基因片段受到保护没有被消化掉。这可能是因为双酶切的条件不适宜导致的，比如酶切反应的时间太长、酶切缓冲液配制不正确、酶的浓度过高或过低等因素都可能影响酶切效率。建议重新评估酶切条件，例如缩短酶切反应时间、尝试调整酶切缓冲液浓度或酶的浓度等，以提高酶切效率。

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huarenqiang5

2023-03-03

有帮助

考虑是跑的时间过长导致质粒DNA降解所导致。

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土井挞克树

2023-03-03

有帮助

首先考虑就是DNA降解，可以缩短跑的时间

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