酶切实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

酶切可用于：（1）获得粘性末端进行连接；（2）验证DNA重组是否成功；（3）验证质粒酶切位点是否有效。

来源：丁香实验

操作方法

酶切实验

一、实验材料准备 1. 材料：质粒DNA。 2. 试剂：限制性内切酶、ddH2O。 3 . 仪器：微量移液枪，离心机，水浴锅，电泳仪，紫外透射观测仪。二、单酶切 1. 在1.5 mL灭菌离心管中依次加入：（1）质粒DNA：X uL（约1 ug）。（2）限制性内切酶：1 uL（约10 U）。（3）10xbuffer：2 uL。（4）ddH2O：补足20 uL。 2.

质粒DNA的限制性内切酶酶切分析

实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。相关基础知识限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。它是基因工程中用于体外剪切基因片段的重要工具酶。上世纪七十年代，当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时，首次发现了限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌