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扩增得到的DNA条带弥散,是引物问题吗

相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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dxy_nkqusvl2

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6 个回答

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Wuwuy

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扩增得到的DNA条带弥散,是引物问题吗?考虑是不是跑完的胶在室温放了很久,或者4度过夜再拍的,一般这种情况拍下来是会弥散的。

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迟C迟

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1、条带大小正确的话可能是样品不纯。
2 、也有可能是样品浓度太大造成的。
3、DNA样品降解,建议重新制样。
4、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
5、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。

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bamboopiggy

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dna条带弥散,和引物关系不大,看看你胶配的匀不?跑胶的buffer没弄错吧?是不是buffer该换了?

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dxywode

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如果你分析了引物的二级结构后确定没问题,那就重新合成一次引物,用新开包装的酶;因为还有一种可能,之前的PCR产物污染了引物或者酶,这种情况也是很常见的。
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天一湖医者

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大多数情况下是由于退火温度过低而导致的非特异性的起始及延伸产生的。对于长片段的PCR,建议将反应体系中cDNA的浓度稀释至1:10(或1:100-1:200)

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未来9

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不一定,PCR条带弥散原因很多

1、 PCR 体系中存在污染 2、电泳槽中电泳缓冲液不净 3、电压不稳定 4、如果 PCR 的模板是经过酒精提取的质粒等相关 DNA,则酒精没有除净 5、退火时间过长或过短。

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