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科研学霸天团，48小时有问必答
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反向遗传做不出来咋整啊啊啊
灵枢天问
这篇文章说的挺详细的，关于反向遗传系统的建立，你参考一下，“流感病毒两种反向遗传学操作系统的初步构建”
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问
🔥 科研圆桌：「中秋」遇上「教师节」应该主动给导师送礼吗？
师医生说
中秋节是中国的传统节日，一般也都会送给长辈或者是恩师一些自己的心意，都是属于人之常情的。导师是自己下一步工作的指南针，主动表达一下自己的心意，送一些特别的礼物都是不错的选择
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问
请问一下非洲猪瘟的红细胞吸附实验的原理与步骤是什么？
毛利小五郎的徒弟
红细胞吸附试验（HA）ASFV 的红细胞吸附试验是该病毒特有的检测技术，其他猪源病毒在白细胞培养物中不存在红细胞吸附特性。当病毒在这些培养物中复制时，多数ASFV 毒株会产生红细胞吸附反应(HAD)，在感染的白细胞周围吸附猪红细胞形成 “玫瑰花环”。但是在没有发生红细胞吸附反应的时候出现细胞病变（CPE），需采用FAT或PCR方法辅助诊断。
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问
小鼠C57的mcao MCAO模型
Dr_劉医生
第一个，具体原因不知道，但可以排查，线栓插好后一定用多普勒监测位置，一般在同侧冠状缝后1mm，中线外1-4mm的位置，确实不太可能出现同侧肢体障碍，除非你插反了；第二个，线栓一般用6号尼龙绳，总长约1.5cm，硅胶头约2mm；线栓要均匀，捋直，不要大头，头重脚轻，不要太粗或太粗；线栓头部一定要先烧一下，圆润，否则易脱落和戳破。第三个，标记的话提前确定好进线深度，一般推荐9.5-10.5mm，太深会
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问
大家做过抗菌肽的体外血浆稳定性实验么
毛利小五郎的徒弟
因为抗菌肽自身稳定性差，一般会用到抗菌肽类似物进行实验，要得到抗菌肽类似物可以用非天然氨基酸Sar（氮甲基甘氨酸）、D-Ala和相应D型氨基酸对polybia-MPI逐个扫描替换，通过多肽固相合成法合成新类似物，这种新类似物的稳定性好很多
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问
请问配13％的CPW清洗液，甘露醇是直接加在里面一起溶解吗？还是CPW配好后溶解甘露醇。它的PH6.0是需要自己调节的吗？感谢大
vlinine
甘露醇可以直接加在里面一起溶解，PH6.0需要自己调节
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问
老鼠膝关节造模实验有哪些？
毛利小五郎的徒弟
你是用来研究关节炎吗？那你可以参考一下oa造模
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问
求助！请问建立标准曲线时，如何配制母液？然后怎么用母液稀释至各种浓度的溶液呢？谢谢！
灵枢天问
你可以直接配置你所需的最大浓度400ug/ml,然后分别用溶剂稀释至低浓度即可
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问
miRNA转染后的回复实验，这个抑制剂和模拟物的选择？
此用户已注销
miRNA转染后的回复实验，miRNA的抑制剂和模拟物的选择，选择质粒
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问
怎么提取植物组蛋白H3呢，想检测H3的乙酰化，是过一些方法沉淀太少没有办法继续做，想求个实验方法，谢谢大家。
毛利小五郎的徒弟
你可以参考一下这篇论文，这是小麦组蛋白提取方法的论文
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问
SOD是测细胞内的还是测培养上清的？
灵枢天问
如果药不多的话那测上清，区别不大
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问
【求助】关于瑞姬氏染色的问题
vvvvvvvm
对染液进行过滤，缓冲液ph是否在范围
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问
蛋白浓缩后析出了可咋整
毛利小五郎的徒弟
不能用了，理化性质改变了，建议你重新提取，不然影响实验结果
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问
求助：有没有外泌体方面的大佬帮个忙，我想问下外泌体进入临床试验需要哪些前期实验。
汤姆卜丽波
至少要做完外泌体本身的分离鉴定，还要进行纯度和成分的检测，探究和疾病的关系，应用到动物实验
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问
求助，己糖，果糖激酶测定方法？
毛利小五郎的徒弟
试验管在37℃水浴，准确放置10min，分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm，用蒸馏水调零，分别读取各管吸光度(Au、Ac、As、AB)。后测定即可
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问
对鼠脾脏中提取的T淋巴细胞体外培养有些疑惑想要求解答
dxy_9f0d5rr
我觉得应该用特定培养基，可以使其更好的被保存以供适用
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问
荧光免疫层析微球大量堵在膜上如何处理
灵枢天问
你可以采取点喷的方式，或者加大表面活性剂的量，然后结合垫要进行预处理
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问
RNA稳定性试验，加放线菌素的浓度，PCR结果如何计算呢？
毛利小五郎的徒弟
A260下读值为1表示40 ug RNA/ml。样品RNA浓度计算公式为：A260 x 稀释倍数 x 40 ug/ml。然后以RNA的浓度来计算PCR
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问
悬浮细胞铺24孔板，明明铺的很均匀，放培养箱几小时后发现中央密度很高，有人知道是什么问题吗
bamboopiggy
没事，这是孔板的边缘效应，尤其你又是悬浮细胞，确实容易中间聚堆，你要是不放心可以用枪吹开
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问
外泌体的使用，静脉注射外泌体后大鼠出现血尿（肾损伤？）
毛利小五郎的徒弟
主在急性肾损伤小鼠模型中观察到，在损伤的肾组织中出现了外泌体的富集，而对照组无此现象[38]。外泌体在病理改变的组织中具有聚集性的机制尚不清楚，考虑可能与外泌体表面表达特异性的受体被炎症细胞识别有关，也可能因炎症和受损组织通透性增高所致。
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