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【原创】TILLING 技术原理及其在植物功能基因组中应用进展

目前关于TILLING 技术炒得比较火,笔者正在从事这方面的工作,搜索论坛里对该技术讨论得不是很多,从目前形势看TILLING 技术技术将会广泛应用。于是就自己所了解的东西写出来供大家研究,同时也希望有兴趣者和我交流希望加分TILLING 技术原理及其在植物功能基因组中应用进展TILLING, 即Targeting Induced Local Lesions IN Genomes(定向诱导基因组局部突变技术),是由美国Fred Hutchins ...

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【共享】全球各实验室如何进行RNAi实验

全球各实验室如何进行RNAi实验?(3)病毒入侵者(Viral Invaders)使用者:南阿拉巴马州立大学微生物学和免疫学教授Sailen Barik项目:敲除编码呼吸融合病毒 (Respiratory Syncytial Virus,RSV) 功能亚基的基因,抑制病毒在小鼠体内繁殖问题:在确保草案全面试实施的同时,用化学修饰法和27mer链拧动以油脂为基础的传递方法:鼻内递送绑定阳离子脂质转染试剂递的siRNAs。Barik说:“对 ...

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【交流】超高通量PCR仪-一次可做上万个qPCR

大家好,Fluidigm BioMark 系统通过集成流体通路(Integrated Fluidic Circuit, IFC),将上万个微小管道、控制阀门集成到微板上,形成纳升(nL)量级的反应仓,不需特别移液器,就可以同时进行多达近万个常规qPCR (传统Taqman 或其他) 实验。操作简单,既有传统qPCR可定量之好处,又有基因芯片高通量耗材少之优点,能大幅提高实验效率及准确度。· 单个细胞基因表达( Single Cell Gene Expression): ...

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【转帖】提高生产,例如通过利用生物技术,可能实际上加剧了饥饿和食物不安全问题,并加深了发展中国家的社会问题

美国的转基因大豆成功的让东北大豆产业接近崩溃,造成了当地农民面临另一种贫困问题。但是,反过来说,如果当地的产业调整过来,价格和品质的提升让大多数消费者受益,正如机器人让劳动密集产业工人失业一样,技术进步与失业、贫苦时常发生矛盾。转基因技术而其他生物技术一样,只是一种工具,应该达成这种共识:(发达国家掌握先进生物技术,并没有使本国农业面临崩溃,相反,可能加剧发展中国家的农业问题,但是对世界而言,解决饥饿问题,以及贫苦 ...

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【转帖】2011年中国工程院院士增选进入第二轮评审的候选人名单

转帖自生物谷2011年中国工程院院士增选进入第二轮评审的候选人名单2011-7-1 11:32:14来源:中国工程院 作者:中国工程院 【大 中 小】药厂的竞争合并与并购?大鱼吃小鱼还是合并?医药巨头面临巨大的选择更多专题...相关阅读葛兰素史克16.5亿美元收购Reliant药业英国最大的制药企业葛兰素史克公司(NYSE: GSK)完成收购Reliant药业公司,收购价为16.5亿美元更多阅读--(各学部名单按照姓名拼音排序)中国工程院20 ...

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【共享】分子生物一线实验人员软件解决方案

在互联网上,有很多软件可以解决分子生物实验人员从立项到最后写论文的实际问题。本文提供了对相同作用的很多软件进行比较后推荐给一线实验人员使用的Windows软件。一、资料收集整理阶段。本阶段需要查找某个专题的文章,并写出对该专题的综述,以便对自己所要做课题的现状有一个基本的了解。推荐软件:Reference Manager 9.0优点:可以在线通过查找关键词搜索PubMed和609个Z39.50数据库中的专业资料,保存 ...

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【共享】开放式课程的好网站

开放原始码理念的开放式课程 原型计划http://www.twocw.net/index.htm简体中文版http://www.cocw.net/朱学恒:“创作共享 天下为公”南方周末   2005-09-08 15:14:52  电脑网络———,宝藏———  不是游戏,也不是纳斯达克神话。  网络延伸到美国、**一些最好的大学,宝藏也只是一份份电子讲义、教材。  一个台湾青年为此拿出了自己的3000万台币。他说,我要把它们翻译成中文,因为它们是“这么好的东西”。  朱学恒:“创作共享 天下 ...

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【交流】怎样选出最合适的Taq酶

怎样选出最合适的Taq酶随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入,PCR已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即Taq酶)的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种Taq酶,能够满足多方面的实验需要。那么,如何选择最合适的Taq酶?根据用户经常考虑的指标,如特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度、能否进行复杂模板扩增以及优化条件难易等等,我们在这儿将主要的Taq酶归归类,其性质、用途也就一 ...

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【交流】质粒抽提

复旦大学生化与分子生物学实验室碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤,而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多,甚至有很多“老师”也 ...

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基因专业英语词汇

A腺苷脱氨酶缺乏症 adenosine deaminase deficiency (ADA)腺病毒 adenovirusAlagille综合征 Alagille syndrome等位基因 allele氨基酸 amino acids动物模型 animal model抗体 antibody凋亡 apoptosis路-巴综合征 ataxia-telangiectasia常染色体显性 autosomal dominant常染色体 autosomeB细菌人工染色体 bacterial a ...

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谈谈SAGE

DNA上所携带的遗传信息,需要通过RNA为中介体,合成出组织和正常生理功能所需要的蛋白质,这个过程被称为基因的表达。在生物体中不同的组织和器官所表达的基因群是不一样的,我们把基因群的表达状况称为基因表达谱。目前,高通量地研究基因表达谱的方法主要有两种,即生物芯片和基因表达串联分析(serial analysis of gene expression, SAGE)。基因芯片所能检测的基因必须是已知的基因,放在芯片上几种基因的探针就 ...

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转基因“减肥”小鼠问世

密歇根大学医学院副教授Ormond A. MacDougald常年针对Wnt10b在脂质细胞发育过程中的作用从事研究。他领导的研究小组2000年曾在《Science》发表文章,证明Wnt10b基因在组织培养中抑制脂肪细胞形成。而这次他们在小鼠上证明了该基因的作用,实验中无论用高脂肪或低脂肪饲料饲喂,高表达的转Wnt10b基因小鼠的脂肪组织都比对照组减少50%,有关研究结果发表在2004年6月份的《Journal of Bi ...

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生物技术的五大障碍

原始出处: 商业周刊 b20191c生物科学倍受关注,生物技术股票上扬。生物技术业还需作何承诺?基因技术公司(Genetech)治疗结肠癌的药物“Avastin”不是一夜之间研制成功的。13年前,公司的一位科学家发现了一种可以控制向肿瘤供血的基因,并开始研究如何杀死这种基因。公司用了5年的时间研制出一种抗体,通过对老鼠的试验,发现这种抗体可以在老鼠身上起到一个类似开关的作用,同时又开发了另外3种抗体,使之形成药物。然后,该 ...

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【交流】2.9kb 膜蛋白片段的EGFP-N3质粒克隆构建------快崩溃了

接手一个2.9kb的克隆构建,装入到EGFP-N3上,选择Xhol/BamhI,片断和质粒酶且完毕,可是怎么也连不上,无奈换酶切位点,换为SalI/BamhI,可是同样问题出现了,怎么也连不上! 无奈先换成克隆半段1.5kb,SalI/BamhI的位点,非常容易得得到克隆, 可是还要全长的啊,在中间靠上的位置找了个unique的酶切位点ppumI,然后把下半段的P出来,使用ppumI/BamhI切好,把构建好的上半段的克隆也使 ...

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想做RNAi的这边看了

siRNA的设计要点一、体外合成siRNA的设计:如何设计有效的siRNA一直是当前RNAi研究的热点话题.基因抑制的有效性很大程度取决于目的基因序列的选择。目的序列可以随机选择也可以通过在目的基因的不同区域上测试不同的序列以决定何种序列是最有效的。以下所述几条对于siRNA设计的成功极为重要。1. 从转录本(mRNA)的AUG起始密码开始,寻找“AA”二连序列,并记下其3''端的19个碱基序列,作为潜在的siRNA ...

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(原创)自己摘抄得超星(DNA和RNA试验)一书,支持一下

【xx】既然是摘抄的就共享吧,不要原创了。谢谢!我发现比较好得超星书籍,但是无法复制和拷贝,只有自己写了,我摘抄了一些大家平时关注得问题,谢谢支持!从组织培养细胞中同时分离DNA和RNA1.PBS:0.137MOL/L NACL,2.68mmol/l KCL,7.98mmol/l NA2HPO4,1.47mmol/l KH2PO4,PH7.22.二乙其焦炭酸盐(DEPC)处理水,1mlDEPC加入到1L得重蒸水中(0.1%DEPCv/v)后搅拌 ...

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【共享】大规模基因组测序

DNA测序技术上的快速发展,加快了我们对不同物种和生物体的基因组序列和结构的研究步伐。在已有GS 20的技术基础上,罗氏诊断公司和454公司不断加大创新投入,又于2007年推出了通量更大,读长更长,准确性更高的第二代基因组测序系统——Genome Sequencer FLX System (GS FLX),相信它的出现,必将掀起测序技术的进一步革命;对整个基因组学的研究将产生巨大的推动作用。GS FLX是世界上第一个可以提供超高通量基因 ...

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【drug-news】外显子测序发现致病突变

来源:生物通儿童交替性偏瘫AHC是一种罕见的严重的神经发育综合症,症状是周期性的偏瘫发作,在发作时患者身体一侧瘫痪,而后又会换成另一侧瘫痪,其发病间隔无法预测。这一疾病的患者通常还伴随有癫痫、学习障碍和行踪困难等症状。Duke大学医学中心的研究人员通过外显子测序发现,大多数AHC患者的疾病是由于一个基因上的突变引起的,并由此给治愈这一疾病带来了新希望。该研究发表在7月29日的Nature Genetics杂志上。 ...

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【共享】RNAi全球资源集锦

RNAi,RNA interference,RNA干扰,是被认为最有前途的一种实验方法。下面是简介,然后是资源汇集。1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样地切断了par-1 ...

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【资源】实验一 质粒DNA的小量制备

最近在做质粒提取方面的实验,搜集了相关资料与大家分享,这是传统提质粒的方法,与试剂盒提质粒不同,通过这个过程大家可以更好的明白实验原理。1.目的学会最常用的小量制备质粒DNA的碱裂解方法。2.原理根据共价闭合环状质粒DNA与线性DNA在拓扑学上的差异来分离。在pH12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性DNA双螺旋结构解开而被变性。尽管在这项的条件下共价闭合环状质粒DNA也会变性,但两条互补链彼此互相盘绕,仍会紧 ...

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