Protein A 柱之进化Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。因而，将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合，可制备用于抗体纯化的亲和填料。早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成，分子量约42KD，结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强，可以吸附大量的lg ...
外源基因在原核细胞中的表达内容一、大肠杆菌表达外源基因的重要性二、大肠杆菌表达外源基因时考虑要点三、原核细胞表达外源基因的基本条件四、外源基因在大肠杆菌表达的主要方式五、外源基因在大肠杆菌中高表达六、外源基因在大肠杆菌中的可溶性表达七、存在问题一、大肠杆菌表达外源基因的重要性1、 大肠杆菌结构简单，遗传背景清楚，基因表达调控机制明确，是表达外源基因合适宿主。2、大肠杆菌易在简单，廉价培基中高密度培养，便于大规模生产。3 ...
原核表达常见问题解答2004-2-25原核表达研究者关心的10个问题pET系统是目前应用最为广泛的原核表达系统，已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。经过与使用过和正在使用这个系统的科学家的交流，我们发现了一些在使用pET系统的过程中以及原核表达中的一些常见问题。在此，我们选取了其中一些比较有代表性的问题，附上我们的建议改进方案，并期待和你一起分享成功的喜悦。1.目的蛋白总是以不可溶的形式出现真是 ...
时间:2013/07/29 - 2013/08/01地点:复旦大学生物医学研究院 上海市徐汇区医学院路138号收费标准:工业6000元/人，学术、科研人员5000元/人，学生3800元/人注册信息: 立即注册内容介绍:主办单位： 复旦大学生物医学研究院康昱盛科技有限公司协办单位： Matrix Science Ltd.Proteome Software Inc.Nonlinear Dynamics Ltd.Ingenuity Systems Inc.组委会主席： 杨芃原 教授/院长 复 ...
1、Caspase Activity Detection Kit (FITC-VAD-FMK) 目录号：QIA90 包装：100T/Kit本试剂盒为您提供了一种快速而灵敏的活细胞内的Caspase 活性的荧光检测方法，所有操作可以在1.5 小时内完成；可以用荧光显微镜、荧光读板仪或流式细胞仪对实验结果进行定量分析；其荧光为绿色荧光，最大激发波长约为485nm，最大发射波长约为535nm。本试剂盒可用于多种种属来源的Caspase 的活性检测，其特别 ...
我的网站提供新书下载http://home.jlu.edu.cn/~see/book.rar(服务器偶尔会中断)20来m吉林大学酶工程实验室 罗贵民主编的（其实是集合了全实验室之力）原始word文稿很好的书8D书 名：现代生物技术丛书——酶工程著 译 者：罗贵民出 版 社：化学工业出版社书 号：7-5025-3704-X出版日期： 2002年5月定价：￥50.00简介该书概括介绍了酶学的基础知识、酶学与酶工程的关系，主要介绍的是化学酶工程和生物酶工程的研究 ...
最近看文献 深有感触啊杂志及年卷期：Nat Med. 2002 Nov;8(11):1288-95. Epub 2002 Oct 7.题目：Adiponectin stimulates glucose utilization and fatty-acid oxidation by activating AMP-activated protein kinase.作者：Yamauchi T, 等.Abstract：Adiponectin (Ad) is a hormone secreted by adipocytes that regu ...
2-D结果分析和解决方法一没有可以看到的清楚的点可能原因1 上样量不够2 由于样品的溶解性太差，使得进入IPG胶条的的样品量不足3 样品含有的杂质阻止聚焦的进行4 IPG胶条的方向放反5 IPG胶条在第二向（水平SDS电泳）中的面放反了6 检测的方法不够灵敏7 检测试剂失效解决的方法1 增加样品的上样量2 增加样品的溶解性3 增加样品的聚焦时间或改变样品的处理方法4 IPG胶条的尖锐端为酸性末端，应该朝阳极5 确保IPG胶条有凝胶的一面放置在第二相 ...
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。一、实验原理EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针，当核酸探针与样本蛋白混合孵育时，样本中可以与核酸探针 ...
迄今为止，蛋白阵列（protein arrays）主要有两种形式：一种是抗体阵列（antibody arrays），利用阵列上的抗体识别样品中的蛋白或其他分子；另一种则是我们今天要谈到的靶蛋白阵列（target protein arrays），通过阵列上的蛋白检测这些我们感兴趣的蛋白和其他分子，如药物、抗体、核酸、脂类或其他蛋白的作用。由于有高通量的优点，蛋白阵列是研究蛋白功能的好工具。但是，通常的靶蛋白阵列生产方式是分别得到不同 ...
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统(蛋白单柱亲和纯化、标记及连接)E6950S pdf下载概述:NEB在世界上最早开展内含肽（intein）技术的开发(1)。IMPACTTM 系统是一种新型的蛋白融合表达及纯化系统，能应用到蛋白质工程的许多重要领域(1-11)。IMPACTTM 表达的目的蛋白与蛋白自剪接元件（称为"内含肽"，intein）及几丁质结合蛋白形成融合蛋白, 通过几丁质柱亲和纯化融合蛋白。然后诱导内含肽的肽键裂解活性，在几丁 ...
HPLC培训教程我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版HPLC法鉴别934150检查1240160含量测定760117387鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(statio ...
微板考马斯亮蓝蛋白定量法1. 0.01%考马斯亮蓝液的准备称取10 mg考马斯亮蓝（coomassie brilliant blue，CBB）G-250溶于5 ml 95%的乙醇中，加入85%的磷酸10ml，混匀，作为储存液保存于4℃。使用时取此母液每1.5 ml用双蒸水稀释至10ml即为工作液，应避光保存，一月内用完。若有不溶沉渣宜滤纸过滤后使用。2. 制作标准曲线表1 组织匀浆液蛋白含量测定中标准曲线的制作试管编号 1 2 3 4 5 6 7BSA Conc 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1（mg/ ...
题目： A Dataset of Human Liver Proteins Identified by Protein Profiling via Isotope Coded Affinity Tag (ICAT) and Tandem Mass Spectrometry类别：蛋白质组／表达谱出处：MCP Papers in Press. Published on July 21, 2004 as Manuscript D400001-MCP200主要观点、创新点及学术、技术意义：• 文章以Huh7人肝癌细胞代表转化细胞，以人胎肝原代 ...
蛋白质结构预测 1蛋白质结构预测的方法蛋白质结构预测的目的是利用已知的一级序列来构建出蛋白质的立体结构模型，对蛋白质进行结构预测需要具体问题具体分析，在不同的已知条件下对于不同的蛋白质采取不同的策略，目前预测蛋白质空间结构的方法可以分为两大类：2.1.1分子动力学方法这类方法采用分子力学、分子动力学的方法，根据物理化学的基本原理，从理论上计算蛋白质分子的空间结构，这类理论计算方法依据一个基本热力学假定：一个蛋白 ...
可与SNP相媲美的另一遗传变异指标—CNV(转载)8D（发现这是一个新东西，发上来大家共享）2月9日《Science》一篇文章公布的新发现，将加速人类疾病相关基因的研究。此报道首次在基因组范围内，观测了个体独特的遗传变异导致独特的基因活动形态的机制。文章题目为《Relative Impact of Nucleotide and Copy Number Variation on Gene Expression Phenotypes》。探究变异和疾病的一大挑 ...
摘要 要在一种宿主表达系统中成功表达外源蛋白并获得较高产量，必须要较为全面地了解影响其表达的诸多因素。影响外源基因在巴氏毕赤酵母中表达的因素主要包括：外源基因的特性、表达框的染色体整合位点和方式、宿主菌的甲醇利用表型、基因剂量、分泌信号、产物稳定性和翻译后修饰等。本文就这些因素进行分析，并提出一定的对策和建议。酵母菌是单细胞真核生物，具有生长快、易于遗传操作、能对外源蛋白进行翻译后加工和修饰、不产生有毒产物等特点，被 ...
经本版热心战友提醒，应该给关心本版的战友一个小小的奖励，请进入发帖、得分排行榜的战友跟帖领分，本版版主除外-skykiller。===2009年度本版人气最旺（点击量最多）的前10个帖子===标题: 【原创】western blot问题解答URL: http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=14134558点击: 37460作者: fangweibin119发帖时间: 2009-03-13 09:53:34标题: 【求助】谁 ...
PCR 引物设计及软件使用技巧摘要：本文旨在介绍使用软件设计PCR 引物的技巧。在PCR 引物设计原则的基础上，详细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法，并对其各自的优缺点进行了比较。一般性引物自动搜索可采用“Premier Primer 5”软件，而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。关键词：PCR；引物设计中图分类号：Q524 文献标识码： 文章编号：1自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来，PCR 技术已成为分子 ...
Western－blotting：SDS-PAGE和免疫印迹一：蛋白质的提取1、取出细胞，倒去培养液，用PBS洗涤细胞一次，充分除去PBS液体，把细胞置于冰上。配置细胞裂解液，细胞裂解液用灭菌水配置，然后按照1：100比例加入PMSF混匀，然后按照细胞的多少加入裂解液于培养瓶中，在冰上放置20min。在此期间每隔3-5min摇晃培养瓶，让其充分裂解细胞。2、裂解结束后，吸取裂解液于另一只1.5ml离心管中，于4℃1300 ...
