恼人的污染！该死的污染！求助：DNA污染如何避免污染如何避免PCR产物污染PCR实验室污染PCR污染与对策PCR污染与对策PCR污染与对策PCR污染与对策紧急求助！pcr污染PCR污染与对策RT-PCR中DNA污染问题请教！急切4次PCR 仅有一次污染（阴性对照见条带），why？Hi,DEAR 师傅:如何在阴性对照组中避免DNA污染的问题PCR污染，原因不知道，请各位高手帮忙分析，谢谢如题，给像我一样在苦苦思考为什么PC ...
应助后请PM求助者！【求助】相同条件下，模板稀释后扩增不出来目标条带http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6324633&sty=1&tpg=11&age=0请问同一种属不同品系的同一基因的MRNA相同吗http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6328875&sty=1&tpg=10&age=0【求助】请教真菌中RT-PCR的内参http://www.d ...
Routine PCR? Let’s be honest, there’s no such thing. Even with the simplest PCR reaction things can go wrong, so you need to have a good checklist of ideas for troubleshooting and rectifying the problem. Today I have brainstormed all of the ways I can think of to approach problems with standard PCR reactions. ...
我想根据keratin基因（有30多个亚型）的共有保守序列，设计引物扩增，那位大侠能帮我找一下好吗？谢谢！keratin 5atgtctc gccagtcaag181 tgtgtccttc cggagcgggg gcagtcgtag cttcagcacc gcctctgcca tcaccccgtc241 tgtctcccgc accagcttca cctccgtgtc ccggtccggg ggtggcggtg gtggtggctt301 cggcagggtc ag ...
我最近设计引物有些困难，我要扩增EBV的BNLF1基因(编码LMP1)的cDNA,两引物各带EcoRI、BamHI 的酶切位点，但是两者的Tm值相差太大，实验时间紧迫，望各位高人替小女子改一改。无限感激！！！！！此致敬礼！！！EBV（B95-8序列，Genebank Acession NO.V10555，1999年）的LMP1的编码基因BNLF1的基因序列（只给出内含子、外显子的序列）：Exon1:169207-169474nt（267b ...
极小巧的序列编辑器我自己设计的只有2K的小巧DNA序列编辑器，为网页文件，无需安装，只要有IE即可运行，辅助进行分子生物学序列编辑、引物设计，可生成互补、反向互补、大写、小写序列、编辑空格等。下载地址：ftp://www.souwo.net/DNA_editor.rar后期原作者将提供自己编写的《引物设计教程》下载或者将下列代码复制并存入文本文件并将扩展名改为htm(网页文件）即可。如果调试有效,请多回贴支持进一步的工具发 ...
基因序列cds，引物，目的片段如下：atggggacgccgggggaggggctg301 ggccgctgctcccatgccctgatccggggagtcccagagagcctggcgtcgggggaaggt361 gcgggggctggccttcccgctctggatctggccaaagctcaaagggagcacggggtgctg421 ggaggtaaactgaggcaacgactggggctacag ...
Protocol for competitive RT-PCRFor quantifying mRNA, we use a competitive RT-PCR protocol with internal standard RNAs. These are added in a defined quantity to the RNA sample prior to the RT reaction. The resulting standard cDNA is coamplified with the same primers as the endogenous target seq ...
各位大虾：我做巢式PCR，内外侧引物条带均不对，作了N次，还是找不道原因，请各位帮忙分析。1、引物：The fisrt pair primer:5'primer:5'CAC TAG AAT GGG CAA CTG GTA GC3'(2-24nt)3'primer:5'CCG AGT ATA CGC ACA ACG CA3'(937-956nt)The second pair primer:5'primer:5'GCC GAA TTC ATG CTC CTA TCG CGG ATT3'(ECORIsite)3'primer:5'GAC CTC ...
PCR的假阳性问题深受重视，但我个人认为PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它涉及了与PCR实验的几乎所有人员和技术环节，十分复杂。就临床而言，大三阳检出率低、甚至于GC镜下都很多时， ...
对琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳有非常详细的介绍,对于刚接触分生大的同志很有帮助.PCR扩增产物的电泳分析 凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种.一、琼脂糖凝胶电泳: 琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法.琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物.根据琼脂糖的溶解温度， 把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖.低熔点琼脂糖熔点为62～65℃，溶解后在 37℃下维持液体状态约数小时，主要用于DNA片 ...
PCR扩增技术，即聚合酶链式反应，是美国科学家K.B.Mullis于1983年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。 现在的PCR扩增不仅可以用于基因的分离、克隆和核苷酸序列分析，还可以用于突变体和重组体的构建，基因表达调控的研究，基因多态性的分析，遗传病和传染病的诊断，肿瘤机制的探索，法医鉴定等诸多方面。PCR扩增技术的基本原理PCR扩增，类似于DNA的天然复制过程，其特异性 ...
Panomics公司的QuantiGene2.0 产品是基于Branched DNA（b-DNA）技术，完成核酸水平的精确定量检测。它克服了传统的real-time PCR（或者q-PCR）技术中的种种不确定因素，无需抽提纯化RNA，无需反转录，无需PCR扩增，对样本量下限无要求（只需mRNA拷贝数在检测范围内），只需将样本用特定裂解液裂解后，经探针杂交与信号放大即可迅速得到比real-time PCR更加精确的定量结果。除细胞、组织 ...
Primer Premier 4.10Primer Premier4.0是由加拿大的Premier公司开发的专业用于PCR或测序引物以及杂交探针的设计，评估的软件，和Plasmid Premier2.02一起是该公司推出的最新的软件产品。其主要界面同样也是分为序列编辑窗口（Genetank），引物设计窗口（Primer Design），酶切分析窗口（Restriction Sites）和纹基分析窗口（Motif）。这里我们主要介绍其引物 ...
感谢您的积极参与关于real time PCR 熔点曲线分析检测点突变real time PCR中的疑问 重组质粒的选择哪里下载rflp－pcr的protocol长片断DNA如何扩增帮忙设计引物这篇文献用的是何方法提的RNA咋回事端粒PCR为什么试验结果不能重复求助M.SssI的使用说明帮分析自行设计的引物引物设计中的疑问一步法RT-PCR和两步法RT-PCR具体有什么不同呢两种逆转录酶（AMV 和M- MLV)的 区别为什么相同的序列用 ...
请教：高保真酶 关于taq plus 求教Pfu酶作PCR的要求 Pfu扩增求救！！！！ 请问哪一种高保真DNA聚合酶比较好呢？Pfu DNA 聚合酶的问题 pfu的扩增条件！ 关于高保真酶问题？ 求助：高保真酶关于高保真酶关于高保真的酶 pfu高保真酶怎么那么难用？Pfu DNA聚合酶------常见问题 请教如何做病毒的 pfu 请教Pfu扩增2kb片段 高保真酶咋还不如普通的Taq酶?请教关于高保真酶问题哪个公司的长距离TAQ酶好?请教长片段的PCR克隆技术 求助：大片断PC ...
希望战友们积极参与，加分从优！求助变性胶的电压求助LD-PCR的原理、应用、特点求助引物设计分析如何计算hardy-Weinberg平衡的理论值 ？可以用spss软件计算吗？求助NaI提取核酸对PCR的影响做PCR过程中有谁听说过或遇到过气溶胶污染吗? 哪个质粒可以做mRNA 稳定性的测定，可以实现定向连接?外周血抽提RNA是否有时间限制？ 用限制性内切酶切片段序列是不是要比环状的载体难得多？帮助分析电泳图求助RT-PCR的 ...
精华内容，与EB相关： 电泳问题 电泳问题（2）EB的危害及安全问题： ask: DEPC AND EB 的英文全名 请问DEPC和EB的毒性何在 求助：EB有何危害？急！ 求救:EB大量污染的补救措施 PCR中涉及有毒物质的步骤 琼脂糖凝胶电泳的时候,EB的毒性问题 请问EB是不是多多益善啊 GoldViewTM DNA染料（溴化乙锭的替代品） MSP中的亚硫酸氢钠处理后... 实验用的EB都是怎么处理的呀EB的配制及使用： 急！向大家求助EB如何配制？ 溴化乙锭的浓度? 急问:已经有配好的0. ...
友情整理 11月1日～11月15日 零应助贴求助血清中提取病毒RNA进行扩增http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4774547&sty=1&tpg=20&age=0SMART RACE 高手看过来:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4774641&sty=1&tpg=20&age=0求各位帮我看看http://www.dxy.cn/bbs/post/view?b ...
过去的几年里人群中肥胖症患者的比例急剧升高。因此对脂肪细胞---脂肪组织的基本组成单位---功能的研究也不断升温。这其中大多数的研究通过从脂肪组织中提取少量的RNA来检测参与代谢调控的低丰度基因表达水平。就小量RNA的检测而言，与传统的RNA定量检测手段（如RNA印迹分析）相比，逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)更为灵敏。实际上，这一技术足以定量单细胞的RNA水平。qRT-PCR应用的主要限制因素是结果的高不稳定 ...
