RT-PCR条带总是不对？急急急！

各位大虾：
我做巢式PCR，内外侧引物条带均不对，作了N次，还是找不道原因，请各位帮忙分析。
1、引物：
The fisrt pair primer:5'primer:5'CAC TAG AAT GGG CAA CTG GTA GC3'(2-24nt)
3'primer:5'CCG AGT ATA CGC ACA ACG CA3'(937-956nt)
The second pair primer:5'primer:5'GCC GAA TTC ATG CTC CTA TCG CGG ATT3'(ECORI
site)
3'primer:5'GAC CTC GAG TCG TAC GTT GCA ACC AGC3'(XHOI
site)
2、序列：（CDS：57--906）
TCACTAGAATGGGCAACTGGTAGCGGTCGCGCCCATGAGGACATGGTCATCAACTAATGCTCCTATCGCGGATTTTGGCATTCCGACAAGCACTCGAAGGAGCCAACCTTTCGCGGAGGAGCGTACTGGCACCAGAGCGCCCTCAGAGAGTCAATTCCAGGAGGTATTGTAAACCAGTAACGGAGTACGTAGCGCAGAGATGCTGCTGCTCTAAACAGCATCTCTCACATGGTCGACACCAGGACACGGCACGTTTAGCAGAAAACGTGGAGACACAAGTGGAACGCGACGATTGCGCTGTACTAACATTATTTCCATCGCGTGACACACCACTTTCGAGTCAGACAGACCTTGCTGACAGCGTCACACTCAGGTCGACCGCACGGCGCGATATGTATCGGCGTTATATCCTGTGCCGATCAACTGGCTCCAGGTGTGTGTTGTGTAGACGAAGCGATAGAGACTTAAGCGTGTGCACATTTCTAGGTCAAGGGCAAAGATATCATACTACCATGTCACAGTGCCATACTGAAGTGCTCATAGTCGCTATTCGACTCTGCAACATACGGTTTTTTCGAGAACGAGATGTCATGACATCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCAGTTGCGATAAGTTGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGTAGTTACCGGGTAAGAGAGTCGGGGCTGAACGGGGTCGTGAAACATTGGACGACGCCTACACGACTGAGATACTCAGGGATTCCACTAGGTTCTAGACGGCGCACCGGGGTAGAGCTCAGTTTTTTGCTGTATGCGAACGGGAAGGCGACTGGAGTGCCATGTCCGGTTTTCAACAAACCATGCAGAATGCTGAATGAGGGCTACGTTTACCACTGCGATGCTGGTTGCAACGTACGATAGCGCTGGCGAATGCGCATTACGGTACGGCTGCGTTGTGCGTATACTCGGTGTAGGTACAGCGATACAGGAACGACTCTGTATTAACTCTTTTCGAGTAATGCTAGAGACGAGATCGAAATAGTCTTCTATGTAAGCCGTAGTTTAGGGCACCACTTTTCAAGAACTCTGTAGCATGCCTAACTACCTGCTCAAATCTGTTACAGTGGCTGATTCGATCCCTATGCATTATGCTATACCGAATACTCCGCGTTTCAACGCGTACTGATAACCTGTCGTACCAACTTAATCGCTGCAGACATCCCTTTCCAGCTGCGTAATAGCGATAGCCCGTACGACTGACCTCGCAACAGTACACTAAATGCAATGCTCTTTCCCTGATATGCACAACAAACGCGTCACGAACGCTTGGCATGATGTCGAACTACCCTAAAGGGCGATACTGTCGTCGTTCACTCTTACAAAACTGTCACGATGCACGGTATACTGACTGCGCCCACTCTACACCAACGTGACCTACCCATTACGGACGAATCCGCCGTTGTGTCCCCACGAGAAATCCAGACGGGTTATTTACTCAGCTCACTATTATAATGTATAGATGAATAGCTGGGCTACACGCGATACGGACGCATGAGCAGCGATATTATATTTTGATTGGACTGTTGGAA
3、内参位置正确，总RNA提取和逆转录均用上海生工的，PCR用的是宝生物的高GC BUFFER 的TAQ酶。各种退火温度都试了，要么没有条带，要么就是800BP（外引物）或500BP（内引物），有时还有长长的拖尾，模板量和延伸时间、循环次数都已调整，还是不见成效。
请各位高手指教，在线急盼回复。