佳杰宝贝 各位老师，我现在做sirna转染细胞，有个问题一直很迷惑，我查资料说脂质体2000转染4-6h后可换成含血清培养基，不影响转染效率，但是换液之后的新长出来的细胞里也含有sirna吗？kikie 该转染的能转染的已经转染了，所以换液没影响。firebaby2007 新细胞里没有，换液只是调整转染后细胞的生长状态，避免对细胞的伤害。happydong 细胞版正在进行siRNA转染答疑，可以去看看：http://cell.dx ...
biophysics hsa-mir-941-4MI0005766 在miRbase上没有相应的染色体位置什么原因？LBN chromosome: 20; Location: 20q13.33 See MIR941-4 in MapViewerbiophysics 谢谢，我已经得到了位置了，hsa-mir-941-4MI0005766206255084562550935+没想到miRbase也会犯这样的错误啊，呵呵本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意 ...
fukota 如果A抑制B,B抑制C，能否证明他们在一条通路上？A通过B抑制C?这种逻辑好像很奇怪耶~fukota 怎么没人说话哩bianbenjamin 信号传导通路实际是一个异常复杂的网络，是网络，不是单线图，一个蛋白与多种蛋白有相互作用，尤其是一些关键节点蛋白，如激酶，磷酸酶等等，所以你说A抑制B，B抑制C就说它们在一条通路上，好像没有什么意义。我们目前所知道的信号传导通路都是在大量文献总结和大量实验验证下推理出来的， ...
jing1209 HR includes gene conversion of the XhoI site without an associated crossover or deletion of one GFP copy by crossover or single-strand annealing.非常感谢！！！LoftyMan HR是不包括主动交换的相关基因交换或单GFP拷贝缺失，也是不包括单链变换的相关基因交换或单GFP拷贝缺失的XhoI区域基因变换jing1209 谢谢LoftyMan， ...
zhang7513 请问各位大侠！Myd88代表什么意思？请指教！谢谢！77472087 髓样分化蛋白-88 myeloid differentiation factor 88, MyD88happylife004007 髓样分化蛋白88， 它是一种接头蛋白分子，含有TIR结构域，在天然免疫中介导信号传导。zhouasd 细胞分化因子88.含有TIR结构的接头蛋白刘芯0220 髓样分化因子(myeloiddifferentiationfactor88, ...
sissiwubing 请问哪位高手知道LA-PCR是什么？zjubell Long and accurate polymerase chain reactiontakara的目录做的比较好，有这些介绍的。不妨去看一下。另外，请不要随意用‘哪位高手知道’这种话我是菜鸟，但是会用GOOGLE，就完全可以回答这种问题了。sissiwubing 看来你是自认为高手才进来的了，菜鸟zjubell sissiwubing wrote:看来你是自认为高手才进来 ...
aidiandian 请教各位师兄，师姐，caspase-3 抗体哪家公司的既便宜又好用啊？在下不胜感激···w_dennis 各位师兄师姐，本人同问该问题，还有caspase-9抗体？nccunccu cell signallingseagate cst有sample kit，带全了，每样40微升selenium Signalway antibody提供免费试用哦，xsk_bio@163.com环佩从容 cell signaling原装最划算。本文由丁香园 ...
不要太懒哦 请教各位高手，如果在细胞的消化传代过程中，我想以EDTA替代胰酶对细胞进行消化的话，EDTA的配方？？？浓度？？多谢！！佳杰宝贝 EDTA可以代替胰酶吗？黑糊糊2000 EDTA 不能代替trypsin,EDTA是螯合剂结合钙离子的，钙离子可以抑制胰酶的作用，所以采用胰酶和EDTA一起来作用，当然EDTA 因为对螯合细胞结构之间的钙离子的作用，所以对细胞有一定程度的离散作用，一般多用的浓度是0.02% 可以用不含钙镁的平衡盐溶 ...
山百合 最近想测细胞内钙离子的变化，由于实验室条件有限，只能去外单位用别人的共聚焦显微镜看。但我的老师提出了问题，钙离子浓度是实时变化的，是否在处理之后有累积效应？我担心的则是处理后用Fluo-3 AM负载后到去外单位检测中间至少有半小时到1h，胞内钙离子会不会变化？（因为我的处理因素是磁场）这段时间是否荧光会有淬灭？我想了想，是否可以用固定剂将细胞固定上？查了些资料，貌似钙离子都是要借助通道或载体来运输的，固定好的细胞 ...
ariel_l 我想问下大家，有没有在做研究启动子活性的时候，在已报道的启动子比如CMV，SV40的下游加入自己的已被先前试验证明可有效启动外源基因转录的一个调控元件片段，结果反而外源基因的表达效率降低了的情况？（这个表达效率降低是和只有强启动子CMV/SV40，而没有自己的调控元件片段的情况对比的结果。）slytjiaofei 【标题】HRE／CMV启动子的克隆和缺氧调控活性的测定【作者】杨洁 杜德伟 李占亭 贾林涛 赵晶 许彦鸣 杨安钢 孙脊峰 ...
yx4122004 对U87细胞，进行某基因的RNAi，效果非常差。U87细胞转染其他质粒则可以，不存在转染效率的问题。而同一序列转染其他细胞，效果可以。可能原因是什么？freecell 转染试剂在不同细胞系上转染效率有所差异，这很正常。这和细胞表面所负电荷等很多因素相关，非一言可概之。song333 RNAi target efficiency is quite different in different cell lines. If this target site d ...
biophysics RT。在miRbase数据库里只能查到pre-miRNA与成熟miRNA序列，为什么没有pri-miRNA序列呢？pri-miRNA序列查找是不是在另一个数据库？zhujoker 请参阅下面一贴：http://biochemistry.dxy.cn/bbs/post/view?bid=154&id=15429796&sty=1&下次发帖前先搜搜！biophysics zhujoker主任,我的问题是如何查找pri ...
xhrg 大家有谁用过pIVEX2.3d或2.4d等用于体外表达的质粒呀，有什么心得freecell 你想知道哪些方面的心得呢？xhrg 还可用什么质粒呢？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming
zhtiantao 各位大侠好，我现在正在做蛋白的结合实验，但是做了之后不知道怎么计算结合常数，我用的荧光探针是1-NPN,先加入缓冲液和蛋白，然后梯度加入荧光探针，从2uM一直加到20uM，每个浓度得到一个相应的荧光值，现在很多文章上写就是根据Scatchard方程计算结合常数，我不知道怎么算，请高手指教，谢谢！！waterbeijing 到底是什么蛋白结合实验啊，说清楚了大家才好对症下药啊lastone9853 参考你 ...
sissiwubing 我刚做的瞬转，转染效率在80%，希望通过Western看一下表达结果（应该为高表达），有未转染的细胞（应有这种蛋白）作对照。结果未转染的细胞有表达，转染的细胞都没有表达，且ß-actin均有表达。求助各位高手，可能有什么原因，非常感谢freecell 上样的总蛋白已经定量过了？每个样做了几个复孔？这个试验重复了几次？该蛋白是否本底表达水平过高？sissiwubing 上样蛋白为四个孔，为两个样分别有两个复 ...
biophysics In contrast, the expression levels of homologues of the miR-17-92 cluster,including miR-18b and miR-363 within the miR-106a-363cluster (chromosome X) and miR-10b and miR-25 withinthe miR-106b-25 cluster (chromosome 7)这是我在文章上看到的一段话，miR-17-92 cluster的同源miRN ...
西点6688 请教一下各位大虾：质粒pACYC184和pBRM-Wt的具体结构是怎样的呢，谢谢！slytjiaofei http://genome-www.stanford.edu/vectordb/vector.html自己查查吧！！！lastone9853 这两个质粒pACYC184和pBRM-Wt的图谱，序列等可以在网上查到，我这有这两个载体，可以快递给你。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...
依然燃 一篇国外文献中提到，细胞的某种基因被siRNA后，此基因的表达水平仅暂时降低，随着细胞分裂的进行，水平会回升。是这样的吗？难道siRNA沉默不是永久性的吗？谢谢！freecell 如果是永久性的，那基因敲除的动物模型就没有用了。siRNA沉默的水平，根据基因性质，会维持或长或短，但是不是永久性的。xuezhishui 不单在细胞水平，就是体内也不可能是一劳永逸的！生命的复杂性就在于其弹性（始终处于平衡状态），这样才能保 ...
starwink 求助对基因芯片结果进行染色体富集和组织表达富集分析的软件，GOTM目前已不能进行以上两方面的分析starwink Gene Ontology Tree Machine在线分析数据库以前可以对多个基因进行组织表达和染色体分布的富集分析，现在不能用了，有其他的相关在线数据分析软件或平台吗？请指教，谢谢！！freecell Try...http://www.geneontology.org/GO.tools.microarra ...
hljzyydx 最近看到一篇文章，里面提到了5'-deoxyribose-5-phosphate(5'-dRP) lyase以及5'-dRP/AP lyase的概念但是我查了半天也没搞明白这到底是指什么，请各位好朋友指点！！谢谢大家了。。freecell http://www.brenda-enzymes.org/php/result_flat.php4?ecno=4.2.99.B1http://www.pnas.org/content/95/21/ ...
