【求助】如何保持住细胞内的荧光?
丁香园论坛
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最近想测细胞内钙离子的变化,由于实验室条件有限,只能去外单位用别人的共聚焦显微镜看。但我的老师提出了问题,钙离子浓度是实时变化的,是否在处理之后有累积效应?我担心的则是处理后用Fluo-3 AM负载后到去外单位检测中间至少有半小时到1h,胞内钙离子会不会变化?(因为我的处理因素是磁场)这段时间是否荧光会有淬灭?我想了想,是否可以用固定剂将细胞固定上?查了些资料,貌似钙离子都是要借助通道或载体来运输的,固定好的细胞应该不会有变化。但是问题又来了,固定剂是否会淬灭荧光?
希望有了解的朋友指点一二。
希望有了解的朋友指点一二。
大家都没遇到过这个问题吗?
买一个抗荧光淬灭剂
看样子只能多做些试验孔或爬片,分时段做了。否则是没有办法做实时动态监测了。谢谢minjing77!
其实建议你拿好实验材料去人家的实验室做。一孵育好就马上共聚焦检测
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