石蜡切片如何保持固定

病理组织切片必须经过固定才能保证后续一系列的制作过程

组织标本要在24小时内尽早的固定，最好是立即固定，越快越好，另外，固定液的选择要使用10%的中性缓冲福尔马林液。

固定液的量必须大于标本体积的4倍以上

固定的温度要保证，至少在24摄氏度及以上的环境中操作。

在操作过程中，要保证酒精脱水和进水的浓度

1. 组织离体后，必须立即固定，越快越好；

2.固定液的选择：最常用的固定液10%中性缓冲福尔马林液，适用大多数样本。

3. 固定液的量：必须大于样本体积的4-20倍；

4. 固定液的浓度：浓度配比必须准确，过高过低都会影响组织的形态和固定的效果；

5.样本的大小：一般不超过1.5x1.5x0.4cm，过大过厚固定液很难渗透，如胃、肠等管腔结构，应切开固定；

6.固定的时间：穿刺及活检小样本固定时间6小时即可，一般样本固定时间在24—48小时，最多不超过72小时

• 组织离体后，必须在1小时内固定。

• 固定液须是组织体积的4-10倍，浓度准确，过稀或过浓都会影响组织形态和固定效果。如发现固定液变质，如甲醛液体产生白色沉淀，应立即更换。

• 固定温度宜室温或放于35-37℃的全封闭组织处理机内，温度过高，会加快组织自溶和过度收缩，破坏细胞内的抗原和DNA。

• 固定时间不超过40小时，根据室温和标本不同而调整。

02恰当脱水
脱水的关键是使低浓度的酒精脱水时间和高浓度酒精脱水时间正确搭配。低浓度酒精可以使组织收缩减少，更好切；高浓度酒精使组织脱水更彻底。
一般情况下，标本脱水时间（35℃）为：75%酒精1.5小时、85%酒精2小时、95%酒精（2次）各1.5至2小时、纯酒精（2次）各1.5至2小时。小标本脱水时间与大标本差异不大，一般没必要分开（小标本发脆往往是纸包太厚或相互粘在一起，组织脱水不彻底引起的。如果时间紧急，也可适当缩短脱水时间，脱水时间长短，与室温高低密切相关，同时也与组织的厚薄、组织类型、组织固定的程度等条件有关）。

组织离体后，必须立即固定，越快越好；固定液的选择：最常用的固定液10%中性缓冲福尔马林液，适用大多数样本。（关于固定液的分类以及特殊样本固定液的选择，以后再说）；固定液的量：必须大于样本体积的4-20倍；