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【求助】二硫键的计算

jiaoyang1978 蛋白质中有6个半胱氨酸,随机形成3个二硫键的方式有多少种?selleckchem01 这个不能用概率论来算的吧~jiaoyang1978 不是作实验什么的,是课后题,答案是30,不知道怎么算的,故求解法。dlzhangyu 就是用排列组合算的嘛,二硫键的形成需要两个半胱氨酸的残基上的硫原子,实际上类似这样,你画一个圆圈,上面有六个点,问连成三条线的方法有几种。那么你随便选一个点,连接另外一个点,有5种方 ...

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【求助】肿瘤原发灶肿瘤细胞和转移灶肿瘤细胞的细胞活性是否完全一样?

冰之鱼 如题: 肿瘤原发灶肿瘤细胞和转移灶肿瘤细胞的细胞活性是否完全一样?有哪些指标可以评价?另外,体现肿瘤细胞特性的指标有哪些?比如增殖周期什么的。我对这方面了解的少,一时也不知道看什么资料, 请帮忙推荐本书看,谢谢~~冰之鱼 有没有人给回答一下啊?冰之鱼 怎么没人管,没人问啊,自己顶!!!!!!!本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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【求助】我想在肺组织做药物抑制平滑肌细胞增殖的细胞周期检测,药物作用于微管导致细胞复制停止于G0/G1和G2/M期,怎么选择周期蛋白呢?

zhao7253 我想在肺组织做药物抑制平滑肌细胞增殖的细胞周期检测,药物作用于微管导致细胞复制停止于G0/G1和G2/M期,怎么选择周期蛋白呢?此药物能稳定已聚合的微管和增强微管的装配,因此导致细胞复制大部分在G0/G1 和 G2/M期受到抑制,急!!!!!!!!!!!!!!谢谢zhao7253 要能做WB和PCR的,谢谢!!!!!zhao7253 谢了 我再研究下本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以 ...

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【求助】求助各位高人,怎样大批冻存细胞并保证其活性?

dxm2005128210 求助怎样大批冻存细胞并复苏因为我的实验要一次性冻存10的8次方至9次方数量级的原代提取细胞,可是每个冻存管里细胞数要控制在10的6次方至7次方,也就是一次要冻存十几或二十管细胞。然后要同时复苏这些细胞,在复苏的过程中,细胞管数太多,全部复苏的时间也很长,以至于离心细胞悬液的时候出现大团的絮状物,考虑可能是细胞死亡,细胞内的核酸、蛋白等物质释放出来。那团絮状物吹不散,最后计数仅获得冻存前 ...

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【求助】怎样根据基因反向检索所对应的microRNA?**啊~~~

pljj2046 各位高手,小弟想根据基因来查询其所对应的microRNA,请问用什么工具啊?TargetScan用不成了吧?**赐教~~~pljj2046 大家元宵吃完了给我讲讲啊~~~pljj2046 高手们快出现啊~~~帮帮忙啊本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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【求助】免疫荧光法能用来做信号通路吗?

konglingrufeng 之前实验设计A组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+培养基B组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+实验诱导剂+培养基C组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+实验诱导剂+培养基D组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+培养基诱导相同天数后在免疫荧光结合共聚焦显微镜技术下,半定量测定OPG/RANKL表达,差异有统计学意义问题1.接下来,能选择一条通路,加阻断剂,然后还是用免疫荧 ...

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【求助】关于细胞周期的检测

yanjing2001 我用药物处理细胞后,流式检测细胞周期,G1期增加,S期减少,G2基本没有什么变化问题一:这是说明药物把细胞阻滞在G1期吗?问题二:把细胞阻滞在G1期与G1/S期阻滞是相同的意思吗?问题三:想进一步通过western blot 检测cyclin确定G1期阻滞,应该检测cyclin d,还是cyclin d1呢,为什么请大家帮忙!sunzhihong490 1.这的看你的细胞组织在G1起的百分比了,随着药物浓度的增加 ...

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【求助】关于western-blot

zhuhuachao 请问各位战友, western-blot法测得的结果是你所要检测蛋白的总蛋白还是只包括游离的蛋白?或者说该目标蛋白与其他蛋白结合以后,western-blot法结果上是否有所反应?amygdala 一般来说,western blot检测到的是包括游离态和聚合态的总蛋白,目标蛋白与其他蛋白结合的情况下也能检测出来。能否检测取决于抗体的识别位点是否存在,通常情况下目标蛋白的抗体识别位点不会受其形成复合物影 ...

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【求助】NF-kB参于凋亡途径

wzmclf 各位,谁有NF-kB参于凋亡途径这方面的图,急用。谢谢有的话能给我一份吗chenyumei_ttkj Nuclear factor kB (NF-kB) is a nuclear transcription factor that regulates expression of a large number of genes that are critical for the regulation of apoptosis, viral replication, tumorigenesis, inflammatio ...

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【求助】对于体外培养的器官,其内部血管还有存在的必要吗?

lesenhower 想到一个问题:体外切断了正常的血供,器官的营养交换取决于简单的灌流。对于血管有畸形的器官,体内会因血供不足发育异常;如果将该器官放在体外培养,由于不依赖血管了,而直接由培养基灌流提供营养,是否就不会存在“血供不足”的问题了,所以反而可能发育正常了?换个说法,对于体外培养的器官,其内部血管是否存在,正常与否还有区别吗?有没有人能给这个问题以确切的答案?谢谢!孤单走着 版主太小气,2叮当,过年啦!整个50叮当。 ...

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【求助】求高人帮忙分析一下细胞荧光的问题,万分感谢!

wliangl 求助各位达人,谁能帮忙分析一下这个问题:使用mCherry质粒(红色荧光质粒)在24孔板转染血管内皮细胞。三天后使用Nikon的荧光显微镜,Texas Red滤镜系统观察:阴性对照(未进行转染,直接培养)和转染细胞同时出现红色荧光,强度相当,转染组全部细胞都出现红色荧光,对照组部分细胞出现,部分细胞较弱,目测感觉全都不像红色荧光表达。问题排除:1. 使用其他滤镜系统没有荧光(GFP,DAPI,CY5)2. 孔板其他孔和 ...

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【求助】GST-pulldown 求助

wltxj 求助:为什么转膜后会曝出GST的条带来,请高手指教! 多谢xindu19881988 是不是本身应该是融合蛋白的,但是会有GST单体存在?我也是这样,不知道为什么。xinyinhancidian 如果是这张胶上GST及其融合蛋白进行转膜,Western blot肯定会有非特异性条带,因为上样量太大了。做GSTpull down之前有必要对自己使用的GST融合蛋白的量做一个定量。纯化GST融合蛋白时,有些容易降解的蛋白质会 ...

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【求助】磷酸化ERK1/2的过表达

nedvedtnt 请问各位高手,有没有构建过表达磷酸化ERK1/2的质粒?因为我所要验证的通路是对ERK1/2磷酸化的抑制作用,必须要一个能够过表达磷酸化ERK1/2的质粒进行干预,请问能否构建这样的质粒?liubingood 表达磷酸化ERK1/2的质粒倒是没听说过,但是ERK1/2的质粒应该是有的。我们曾经构建过akt的强制表达质粒。为何要表达呢?可以采用一定的刺激因子使磷酸化ERK1/2表达升高,再用你的因素处理 ...

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【求助】急求细胞免疫荧光的问题

zhuzhu007 请问在做细胞免疫荧光时,用Tween20打孔,也就是做细胞通透的时候,浓度是多少?rongjiansu 这个要靠实验去摸索,一般用0.1% 的浓度处理5-10分钟不等。做微管最多可以用到10%。关于如何优化,Nature protocol上面有一篇文章,专门讲免疫荧光实验条件的优化zhuzhu007 rongjiansu wrote:这个要靠实验去摸索,一般用0.1% 的浓度处理5-10分钟不等。做微管最多可以用到10%。关 ...

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【求助】急求,什么是信号通路对话?

新手上路多包涵 在网上查了一些资料看,但还是不大明白,请教高手们提供点资料学习学习。另外这个东西,现在研究的热么?呵呵。谢谢rongjiansu 對話的英文為cross talk,指的是不同信號通路間的相互作用,通常是關鍵的調控分子特別是Kinase之間的相互作用,一直是細胞生物學研究的熱點問題。另外還有convergence和disperse,是信號通路三大特性。liubingood rongjiansu wrote:對話的英 ...

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【求助】siRNA PI3K/Akt NF-KB 膜蛋白

狼伟人坯子 由于课题需要,需要做乳腺癌方面的通路研究,思路问题想和大家探讨一下,希望大家多多指正:1. 某个细胞因子(暂且定义为A)的siRNA干扰48h后,提RNA和Pr,检测细胞膜上某个蛋白(暂且定义为B)的表达水平变化(前期实验结果表明,RNA水平下调,蛋白水平还未做)2. A siRNA 干扰48小时后 提蛋白 做PI3K/Akt,NF-kB的总蛋白和磷酸化水平的WB3. A siRNA 干扰48小时后,NF-kB与蛋白B启动子的双荧光素梅报告系统或 ...

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【求助】研究细胞内Protein translocation都有什么好方法?

thisiscc 目前仅知道能用GFP做成融合蛋白,并在显微镜下观察,但也不了解更多细节。有熟悉这方面的,能提供一些研究方法,和技术细节不。能告诉哪些相关Publication也行。不甚感激。thisiscc 忘了说了,主要是想看目标蛋白在细胞质与细胞核的分布情况,及其在一定条件下的变化。Thanks again.rongjiansu 免疫荧光法观察处理前后目标蛋白在细胞中的分布,不过抗体的细胞内定位一般不准,不太可靠构建GFP ...

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【求助】SHH通路激动剂

薇安夕夕宝 请问有人了解SHH通路吗?这个通路有激动剂吗?acola SAG C28H28ClN3OS黑糊糊2000 Oxysterols, could be one but not sure can be used for all the cell lines本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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【求助】体内培养定义

xiaoerlong 求“体内培养”定义lightningwing 能否说的详细些,是抗体这类的体内培养,还是生物医学工程相关的体内培养?xiaoerlong 生物医学工程相关的体内培养(细胞培养方面的)xiaoerlong lightningwing wrote:能否说的详细些,是抗体这类的体内培养,还是生物医学工程相关的体内培养?生物医学工程相关的体内培养xxsl_2007 还真不好回答。体内培养是在动物体内生产所需物质的方法,如 ...

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【求助】TGF-β 诱导EMT过程中需要换液吗?

beyond211 不知TGF-β 在培养液里的半衰期是多久,如果我要持续刺激72小时,请问期间是否需要换液并换上新的TGF-β ?slimmerchan 我的经验是不需要,不过到第三天可以看到一些漂浮的死细胞sesame0415 我是在48小时后换液的,在相关文献中看到的…本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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