【求助】关于western-blot

请问各位战友， western-blot法测得的结果是你所要检测蛋白的总蛋白还是只包括游离的蛋白？或者说该目标蛋白与其他蛋白结合以后，western-blot法结果上是否有所反应？

一般来说，western blot检测到的是包括游离态和聚合态的总蛋白，目标蛋白与其他蛋白结合的情况下也能检测出来。能否检测取决于抗体的识别位点是否存在，通常情况下目标蛋白的抗体识别位点不会受其形成复合物影响，但也有极少数情况下复合物的形成正好会覆盖抗体识别位点，这时只需改用另一种抗体即可。
有两点需要注意：1. 样品的一般处理过程往往会破坏蛋白的相互作用，一些生理状态下以复合体存在的蛋白往往会分离而成为游离状态；2. 以复合体形式存在的目的蛋白条带往往出现在较高分子量区。

谢谢了，受教了。特别是2个注意点。