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【求助】免疫荧光法能用来做信号通路吗?

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之前实验设计
A组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+培养基
B组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+实验诱导剂+培养基
C组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+实验诱导剂+培养基
D组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+培养基

诱导相同天数后在免疫荧光结合共聚焦显微镜技术下,半定量测定OPG/RANKL表达,差异有统计学意义

问题1.接下来,能选择一条通路,加阻断剂,然后还是用免疫荧光结合共聚焦技术测定OPG/RANKL表达,来确定是否实验诱导剂有通过该通路发挥作用吗?看了一些文献,几乎没有看到用免疫荧光来做信号通路的,还是我看到文献太少。
问题2.小鼠成骨细胞OPG/RANKL的信号通路,有没有推荐的,给个参考意见,能附上资料最好。

非常非常感谢!
应该没问题,不过检测蛋白表达最主流还是用western方法,免疫荧光主要是检测蛋白表达定位,在表达变化不大情况下,荧光很难体现出来。所以,不建议用免疫荧光检测。

通路方面,自己去数据库中查相关文献吧。现在很多数据库都有对信号通路的介绍!
konglingrufeng wrote:
之前实验设计
A组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+培养基
B组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+实验诱导剂+培养基
C组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+实验诱导剂+培养基
D组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+培养基

诱导相同天数后在免疫荧光结合共聚焦显微镜技术下,半定量测定OPG/RANKL表达,差异有统计学意义

问题1.接下来,能选择一条通路,加阻断剂,然后还是用免疫荧光结合共聚焦技术测定OPG/RANKL表达,来确定是否实验诱导剂有通过该通路发挥作用吗?看了一些文献,几乎没有看到用免疫荧光来做信号通路的,还是我看到文献太少。
问题2.小鼠成骨细胞OPG/RANKL的信号通路,有没有推荐的,给个参考意见,能附上资料最好。

非常非常感谢!
不是很明白你实验设计C组的目的是什么?免疫荧光主要是观察蛋白定位情况的。

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