【求助】做mTOR信号通路的花费
丁香园论坛
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各位站友，小弟打算做干预手段对Akt、TSC1/2、Rheb、mTOR、4E-BP1、P70S6K、AMPK磷酸化表达的影响，不知道有没站友知道做这样的实验大概要花多少钱呢？主要是试剂方面的。
另外，请问判断mTOR信号通路的变化是用磷酸化表达还是用mRNA表达来反映更好呢？
请各位大大指点！！！谢谢！！！
另外，请问判断mTOR信号通路的变化是用磷酸化表达还是用mRNA表达来反映更好呢？
请各位大大指点！！！谢谢！！！
试剂主要是磷酸化抗体，每种大概3-4000左右，做mTORx信号通路主要是用AKT磷酸化的变化来反映。
zhibinx2007 wrote:
试剂主要是磷酸化抗体，每种大概3-4000左右，做mTORx信号通路主要是用AKT磷酸化的变化来反映。
谢谢站友的回复！请问是做一个蛋白就要相应的一种抗体么？比如要测mTOR、AKt、4E-BP1这三个的话，那这三个的抗体都需要？
不需要作mRNA的表达变化吗？
是的。你主要检测磷酸化的变化，所以我觉得不需要做mRNA，比如检测磷酸化的AKT，你以AKT蛋白为对照，需要两种抗体，一种是磷酸化AKT，一种是AKT抗体。
zhibinx2007 wrote:
是的。你主要检测磷酸化的变化，所以我觉得不需要做mRNA，比如检测磷酸化的AKT，你以AKT蛋白为对照，需要两种抗体，一种是磷酸化AKT，一种是AKT抗体。
那么请问我如果是要测mTOR、4E-BP1和P70S6K的话，就分别需要磷酸化mTOR、mTOR抗体，磷酸化4E-BP1、4E-BP1抗体，磷酸化P70S6K、P70S6K抗体是吗？然后每种要3-4000，那就是总共需要20000多左右了是吧？小弟没做过这些东西，是个菜鸟，呵呵...
非磷酸化的抗体也需要订，作为阴性对照来用
解释的不错~~
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