【求助】GST-pulldown 求助

丁香园论坛2015-08-21

1541

wltxj

求助：为什么转膜后会曝出GST的条带来，请高手指教! 多谢

xindu19881988

是不是本身应该是融合蛋白的，但是会有GST单体存在？我也是这样，不知道为什么。

xinyinhancidian

如果是这张胶上GST及其融合蛋白进行转膜，Western blot肯定会有非特异性条带，因为上样量太大了。做GSTpull down之前有必要对自己使用的GST融合蛋白的量做一个定量。

纯化GST融合蛋白时，有些容易降解的蛋白质会出现电泳时有类似GST分子量的降解条带出现。

山明水秀lxm

请问GST pulldown的柱子从哪里买到的，具体叫什么柱子呢，谢谢

xiaohuilang

上样量太大造成的

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