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【求助】求助各位高人,怎样大批冻存细胞并保证其活性?

丁香园论坛

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求助怎样大批冻存细胞并复苏

因为我的实验要一次性冻存10的8次方至9次方数量级的原代提取细胞,可是每个冻存管里细胞数要控制在10的6次方至7次方,也就是一次要冻存十几或二十管细胞。然后要同时复苏这些细胞,在复苏的过程中,细胞管数太多,全部复苏的时间也很长,以至于离心细胞悬液的时候出现大团的絮状物,考虑可能是细胞死亡,细胞内的核酸、蛋白等物质释放出来。那团絮状物吹不散,最后计数仅获得冻存前20%的细胞数。
这样辛苦获得的原代细胞就损失了很多,因为每次获得细胞都是很不容易的,但是冻存后复苏就损失了一大半,迫切希望有高人指点,怎样批量冻存细胞,并在复苏的过程中保证细胞活性。不知道有没有师兄师姐做过这方面的实验,在此求助,对于你们的建议表示感谢!!!
为什么要冻存原代细胞,放假?方法对的话 或许会好点
不是放假哦,是实验设计思路,细胞冻存后,在合适的时机进行回输。尝试过冻存几管细胞,然后复苏,是没有出现絮状物的,可是管数增加后就会出现细胞的死亡。不知道这个问题有人遇见过没?

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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