求助！抗菌活性物质过高效液相色谱后活性完全消失，不知道是什么原因

我认为你的样品可能不是蛋白类物质，才会产生这样的结果

在您的实验中，可能有多种原因导致抗菌活性完全消失。以下是一些可能的原因：

洗脱条件不足：您的样品可能被吸附在制备柱上，而没有被完全洗脱。您可以尝试使用更强的洗脱缓冲液来洗脱样品。

流动相成分不适合：您的流动相成分可能不适合您的样品。您可以尝试更改流动相的成分和洗脱梯度，以改善样品的分离和纯化效果。

样品不稳定：您的样品可能在高效液相色谱过程中失去了稳定性，导致活性完全消失。您可以尝试优化您的样品制备方法，以确保样品的稳定性和纯度。

高效液相色谱柱损坏：您的高效液相色谱柱可能已经损坏，从而影响了分离和纯化效果。您可以更换新的柱子并重新进行实验。

其他可能原因：您的实验中可能存在其他可能导致抗菌活性消失的因素，如使用的样品浓度不合适、温度或pH值不稳定等等。您可以进一步检查您的实验条件，以找到问题的根源。

您可以根据上述建议逐一排查，找到导致抗菌活性完全消失的具体原因，并采取相应的措施来解决问题。

考虑可能是色谱柱被污染。建议用纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。