化学电离(CI)法
最新修订时间：
原理
兴奋剂检测工作中, 当发现阳性可疑的样品时, 一般是借助化合物的气相保留时间及质谱图来进行确证分析。但是, 有一些 Β2阻断剂(或其代谢物) 的质谱图极其相似, 给确证工来带来很大麻烦, 甚至造成错误的结果。我们曾使用光气衍生化的方法取得好的结果, 但光气的剧毒使操作十分不便, 不适合日常分析。为此我们使用GC-MS的化学电离功能(CI) 得到特征性很强的质谱图, 并用于尿样分析, 得到满意结果且无需额外操作。
材料与仪器
尿样
L-半胱氨酸 乙醚 异丙醇 浓盐酸 NaOH NaHCO3 K2CO3 STFA BTFA
气相色谱- 质谱联用仪 振荡器 恒温水浴锅 交联石英毛细柱
L-半胱氨酸 乙醚 异丙醇 浓盐酸 NaOH NaHCO3 K2CO3 STFA BTFA
气相色谱- 质谱联用仪 振荡器 恒温水浴锅 交联石英毛细柱
步骤
1.尿样的萃取和衍生化
取 5ml 尿样于 10ml玻璃试管中， 加入 0.15ml 浓盐酸和 100mg L2半胱氨酸， 混匀， 试管口盖上玻璃小球， 在 100℃烘箱内水解 30m in, 冷却后加入 3m l 乙醚， 在振荡器上振荡10min, 离心 5min （2500rpm ） , 抽去上层醚液， 在水相中加入 0.16ml NaOH 溶液 （12mol/L ） , 混合均匀。此样与另一 5ml 尿样分别加入 2g 固体缓冲剂（NaHCO3 : K2CO3= 3: 2） , 此时溶液的pH 值约为 9.14,再分别加入 3ml 提取液（乙醚ö异丙醇= 9: 1） , 振荡 10min, 离心5min, 将两份有机相吸出、合并， 于 50℃氮气流下吹干， 加入 100Λ1M ST FA , 在 70℃下加热 10min, 再加入 30ΛlM BT FA , 同样条件下再加热 10min 所得溶液在GC-MS上进样2μl.
2.质谱分析
依照以上的实验步骤， 采用 GC-MS 的 CI 源来分析 EI 质谱图特征性不强的 Β2阻断剂， 将原型及代谢物的CI 谱图与相应的 E I 谱图相比较， 得出结果。并以ALP 为例列出其原型及代谢物的质谱图。
注意事项
每种化合物的CI 谱图有以下明显的特征: ①有较强的准分子离子, ②有较强的M - CH3 (即M-15) 离子, ③有较强的M - OTM S(即M - 89) 离子, ④有较强明显的M + C2H5 离子。由以上的特点可以非常容易地区别各种化合物。
常见问题
来源于《质谱学报》
来源：丁香实验
