【求助】研究细胞内Protein translocation都有什么好方法？

丁香园论坛2015-08-21

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thisiscc

目前仅知道能用GFP做成融合蛋白，并在显微镜下观察，但也不了解更多细节。

有熟悉这方面的，能提供一些研究方法，和技术细节不。

能告诉哪些相关Publication也行。不甚感激。

thisiscc

忘了说了，主要是想看目标蛋白在细胞质与细胞核的分布情况，及其在一定条件下的变化。

Thanks again.

rongjiansu

免疫荧光法观察处理前后目标蛋白在细胞中的分布，不过抗体的细胞内定位一般不准，不太可靠

构建GFP tag的重组质粒，转染，处理，观察荧光的分布

分离细胞浆蛋白和细胞核蛋白，用Western鉴定目标蛋白在浆蛋白和核蛋白中的含量

后两条非常准确，但消耗的银子过多

thisiscc

已经决定构建GFP tag的重组质粒了，很感谢楼上的解答。

本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴

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