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染色体扫描电镜标本制备及观察

一、原理 扫描电镜用于观察标本的表面形态。用戊二醛和锇酸处理的染色体标本,经单宁酸(或硫卡巴肼)还原可获得较好的导电染色效果。在扫描电镜下可观察到染色体的三维结构,也可用于常规染色体核型、G带染色体核型、高分辨染色体核型的分析及染色体结构异常识别,以弥补光镜的许多不足。在扫描电镜下还可清楚地观察到肿瘤细胞癌基因扩增结构—双微体。因而此方法广泛用于细胞生物学和遗传学的许多研究。 二、染色体标本制备的方法 1.常规染色体标本制备,同实验十。 2.取一张在光镜下观察过的染色体标本片选择分散良好的分裂相,并在背面做出标记以便电镜观察时易于寻找。 3.3:1甲醇一冰乙酸脱色,用磷酸缓冲液洗。 4.2.5%戊二醛固定30分钟。 5.0.1mol/L(pH7.4)PBS漂洗3次。 6.1%锇酸固定5分钟。 7.蒸馏水洗3次。 8.2%单宁酸处理5分钟。 9.蒸馏水洗3次。 10.1%锇酸处理lO分钟。 11.水洗3次。 12.30%→100%乙醇逐级脱水,每级5分钟。 1

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细胞显微摄影

一、原理 生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面,主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。 二、操作步骤 (一)拍摄前准备 1.光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。 2.柯勒氏照明 使观察的视野获碍均匀而又充分的照明;防止杂散光对照相系统产生影响;使被摄物体不受热,影象清晰。 3.物镜与目镜合理组合 依标本的不同和显微摄影要求,物镜与目镜的组合有一定规范,如:拍摄人类染色体影像,采用高分辨率的100倍油镜,配合10倍目镜,可获得良好分辨的理想放大影像。 4.调整视场光阑和孔径光阑 使两者与所用物镜的数值孔径(N.A.镜口率)相等,所得的分辨力最高;视场光阑一旦调好,不要再动,而孔径光阑可随物镜数值孔径的更换,做相应的调整。一般来说,把孔径光阑的大小调成等于相应该物镜孔径像的2/3为宜,尽管丧失了少许的分辨力,却能提高影像的反差、焦点深度和清晰度。 总之,上述作法是调整显微镜至最佳状态。 (二)拍摄程序 拍摄是显微摄

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正常细胞与肿瘤细胞常规核型的标本制备

一、微量全血培养 (一)原理 人体外周血中淋巴细胞是成熟的免疫细胞,正常情况下处于G。期不再增殖。PHA(Phytohemagglutinin,植物血凝素)是人和其它动物淋巴细胞的有丝分裂刺激剂,它能使处于G0 期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进入细胞周期开始旺盛的有丝分裂。 人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便,在 PHA作用下进行短期培养即可获丰富的、有丝分裂活跃的淋巴母细胞,适于制备核型标本。各种因素的效应(如病毒、电离辐射、化学药剂等)也可在淋巴细胞的培养条件下进行观察,从而进行多种在体内无法进行的研究。因此它是细胞生物学及其它学科研究中的一种有效的方法。 (二)操作 1.打开超净台紫外灯20~30分钟。洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台,点燃煤气灯。用75%酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面,然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。 2.在超净台内将每个培养瓶装入5ml培养液及0.2ml PHA溶液,封好备用。 3.用5ml注射器,7号针头,先吸取少许肝

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线粒体的活体染色及电镜照片观察

一、兔肝细胞线粒体的活体染色 (一)原理 线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。 (二)方法 用空气栓塞处死兔子,置于解剖盘内,迅速打开腹腔,取兔肝边缘较薄的肝组织一小块(2~3mm3 ),放入盛有Ringer氏液的平皿内洗去血液(用镊子轻压),用吸管吸去Ringer氏液,在平皿内加1/300詹纳斯绿B染液,让组织块上表面露在染液外面,使细胞内线粒体的酶系可进行充分的氧化,这样才有利于保持染料的氧化状态,使线粒体着色。当组织块边缘染成篮色时即可,一般需要染30分钟。 染色后,将组织块移到载片上,用镊子将组织块拉碎,就会有一些细胞或细胞群从组织块脱离。 将稍大的组织块去掉,使游离的细胞或细胞群留在载片上,加一滴Ringer氏液

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大分子导入细胞技术

大分子导入细胞技术 外源核酸、多肽导入受体细胞的方法繁多,大致可分为三类:化学方法、物理化学方法和生物学方法。化学方法常见的有磷酸钙沉淀法、DEAE葡聚糖转染法、脂质体转染法和PEI介导转染法等;物理方法有电穿孔法,基因枪粒子轰击法等;生物学方法中,目前主要是利用病毒作为外源核酸、多肽导入的工具,通过病毒感染将外源核酸、多肽导入受体细胞内。 实验  细胞显微注射技术 [实验目的] 1 了解细胞显微注射的基本原理 2 掌握细胞显微注射基本技术 [实验原理] 显微注射技术是利用显微操作系统和显微注射技术将外源目的基因直接注入到受精卵的原核中,使外源基因整合到受体细胞的基因组内,再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体动物的子宫内发育,从而获得转基因动物。它是目前基因转移效率较好的一种基因转移方法,可直接用不含有原核载体DNA片段的外源基因进行转移;外源基因的长度不受限制, 可达100kb ;实验周期相对比较短。它的不足之处是:需要昂贵精密的设备;显微注射操作复杂,需专门技术人员;导入外源基因整合位点和拷贝数无法控制;常导致插入位点附近宿主DNA

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原核细胞

  两大细胞类群之一,细胞膜内原生质体中含一条裸露的 DNA分子,形成“拟核”,但没有核膜和核仁等结构。在细胞进化上处于原始地位。原核细胞的体积很小,一般为 1~ 10微米。原核细胞原生质体外周有质膜,其结构与化学组成和真核细胞相似。质膜外有细胞壁,主要由蛋白多糖组成少数含有其他多糖和类脂,有的细胞壁外还有胶质层原生质体内有一个含 DNA的区域称为拟核,拟核没有核膜和核仁的分化,只由一条 DNA构成。这种 DNA不与蛋白质结合形成核蛋白。原生质体中没有内质网、高尔基体、线粒体和叶绿体等细胞器,但有核糖体和中间体,有的含有类囊体。核糖体是蛋白质合成的场所。中间体是质膜内陷折叠形成的简单结构,与细胞的能量代谢有关。类囊体具有光合作用功能。在原核细胞中还有糖原颗粒,脂肪滴和蛋白质颗粒等后成质。由原核细胞构成的生物叫原核生物,主要包括细菌、蓝藻、原绿藻和放线菌,以及立克次氏体、支原体和衣原体。

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分裂间期

  真核细胞在细胞周期中,由上次细胞分裂结束到下次细胞分裂开始的持续时间。间期细胞进行旺盛的生物合成和生长,是细胞进入有丝分裂期的重要准备阶段。间期可划分为: G1 、 S、 G2 三个时期。 G1 期又叫 DNA合成前期,该时期的子细胞体积逐渐长大,其内部的细胞器逐步装配完善并行使特定功能,因此细胞内急剧合成 RNA和某些专一性蛋白质。 G1 期的持续时间约 8小时。 S期又叫 DNA合成期,该时期细胞不仅完成 DNA复制,同时进行合成组蛋白和非组蛋白。新复制的 DNA与新合成的组蛋白迅速结合构成核小体,由核小体串连成染色质细丝,从而完成染色质复制。 S期的持续时间约 6小时。 G2 期又叫 DNA合成后期,该时期合成细胞有丝分裂期所需要的蛋白质和刺激因子,以及必需的能量准备。此外,核内染色质细丝开始凝缩。 G2 期的持续时间约 5小时。

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细胞学说

  首先由德国植物学家 J. M.施莱登( Schleiden, 1838)和德国动物学家 T.施旺( Schwann, 1839)两人提出的,是关于一切植物和动物均由细胞构成,细胞是生物体结构和功能的基本单位的学说。 人类对生物体微观结构的认识和显微镜的发明及其技术发展分不开。 1665年 R.胡克( Hooke)用自制显微镜观察木栓薄片,首先发现并描述了死细胞。 1671年, M.马尔比基( Malpighi)观察到活细胞内的细胞质。 1675年 A.列文虎克( Leeuwenhoek)观察到原生动物、人和哺乳动物的精子,首先描述了鲑鱼红细胞的核。 1831年 R.布朗( Brown)在兰科植物叶表皮细胞中发现细胞核及核仁。 1835年 F.杜雅丁( Dujardin)发现根足虫和多孔虫细胞的内含物。 1839年 J. E.浦金野( Purkinje)把植物细胞中物质统称原生质,同年 H.莫尔( Mohl)和 C. W.内格利( Ngeli)指出原生质是动植物细胞所具有的共性成分。早在 1809年 C. F.米贝尔( Mirbel)就指出:“植物是由有膜的细胞性组织构成”

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流动镶嵌模型

  指 1972年由 S. J.辛格( Singer)和 G.尼克森( Nicolson)提出的关于质膜的分子结构模型。它强调脂类和蛋白质分子间的镶嵌关系及膜的动态性。关于细胞膜的分子结构,人们根据质膜内蛋白质和脂质分子排列分布的可能性,以及电镜下观察到的膜结构,曾提出几种假设和模型。 1957年 J. D.罗伯逊( Robertson)在丹尼里 -戴维森 Danielli-Davson模型基础上又提出质膜分子结构的单位膜模型,认为细胞膜和细胞内膜系统的膜结构类似,都有 3层结构:中间层电子密度低的部分是脂类双分子层,内外两层电子密度高的部分由薄片状蛋白质组成。罗伯逊认为,这种结构是生物膜的基本结构,并取名为单位膜。这种单位膜一度得到广泛的支持。但是,单位膜模型难以说明各种膜结构的功能特殊性等,于是进入 60年代以后,又提出许多新的模型。其中,流动镶嵌模型对膜的各种性质的解释最有说服力,其基本要点概括如下:( 1)单位膜的中间以磷脂双分子层为基本骨架。磷脂的亲水端面向膜的两侧,疏水端面向膜的中间。脂类双分子层的厚度为 3.5nm。( 2)组成单位膜的蛋白质一般都是球蛋白,有的

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自由扩散

  物质通过质膜进出细胞的方式之一。物质从高浓度一侧通过质膜向低浓度一侧的扩散,不需要载体也不消耗能量。物质的自由扩散速度,与物质的脂溶性程度、膜两侧溶质浓度差、溶质分子大小和电荷性质等有关。由于脂类双分子层构成质膜的基本骨架,脂溶性物质能够溶于膜脂内,因此能优先通过细胞膜进出细胞。大量实验表明,许多物质通过质膜的扩散速度都与其脂溶性程度成正比。水几乎不溶于脂,水分子可以经过质膜上的小孔自由进出细胞。但是,水和脂溶性物质分子的移动方向和速度,决定于浓度梯度。物质的扩散取决于浓度梯度,溶质浓度差愈大,扩散速度愈快。此外,某些溶于水的无机离子也能通过自由扩散进出细胞,它们不但受浓度梯度的影响,还受电荷性质的制约。细胞内有一些浓度高又不能扩散出细胞的阴离子,因此,带正电荷的离子较易进入细胞,带负电荷的离子则较难进入细胞。

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主动运输

  物质通过质膜进出细胞的方式之一。是质膜上载体蛋白消耗能量而协助物质逆浓度梯度运输的方式。主动运输和协助扩散虽然都是在载体蛋白协助下运输物质,但两者有两个主要区别:一是主动运输是质膜上载体蛋白逆浓度梯度运输物质;二是主动运输与能量代谢联系,载体蛋白消耗 ATP提供的能量。例如,枪乌贼神经纤维内部 Na 含量相当于外部 Na 含量的十分之一。如果向枪乌贼的巨大神经纤维内部注射 24 Na ,不久即测得神经纤维周围溶液中存在 24 Na ,这说明 Na 逆浓度梯度输出细胞。如果在神经膜外液中加入抑制 ATP酶活性的药物(如氰化物), 24 Na 的外流迅速停止;当向中毒的神经纤维内注射 ATP时, 24 Na 又重新外流,直至 ATP全部用完。这个实验结果表明,物质逆浓度梯度的运输要有能量供应。主动运输方式能够保证细胞按照生命活动的需要,主动地选择吸收所需要的营养物质,对于活细胞完成各项生命活动有重要作用。

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蛋白质(protein)

  氨基酸用肽键相连构成的生物大分子,是细胞最重要的功能成分,约占原生质有机成分的一半。   功能 基因表达成蛋白质,才能体现生物的特性。蛋白质的功能多种多样,可列举如表。   分类 整个生物界的蛋白质有百万种以上,分类方法如下:   依据功能分类 除贮存蛋白质和结构蛋白质外皆为功能蛋白质(酶、调节蛋白、运动蛋白,运输蛋白、防御蛋白等)。   依据多肽链的数目分类 只含一条多肽链的蛋白质称单链蛋白质;含有2条或多条多肽链的蛋白质称寡聚蛋白质。寡聚蛋白质的多肽链数目一般为偶数,其中的多肽链叫做亚基。   依据化学组分分类 只含氨基酸成分的蛋白质称单纯蛋白质,又可根据溶解度及来源分成清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶谷蛋白等。除氨基酸外还含有非氨基酸成分的蛋白质叫做缀合蛋白质。其非氨基酸部分称作辅基。根据辅基的化学性质不同又可分成脂蛋白(含脂质),糖蛋白(含糖类)、核蛋白(含核酸)、色蛋白(含色素)、黄素蛋白(含核黄素)、金属蛋白(含铁、铜或锌等金属)等。辅基通常和缀合蛋白质的功能密切相关。   依据分子形状分类 可

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联会复合体

  减数分裂Ⅰ的偶线期中,配对的两条同源染色体之间形成的一种复合结构。它对于维持同源染色体配对的稳定性,以及同源染色体的局部交换,是不可缺少的条件。联会复合体是由核蛋白组成的扁带状三分区结构,总宽度约为 150~ 200纳米。在减数分裂Ⅰ的细线期,每个染色体的两条染色单体之间出现一种宽约 30纳米的线状结构,该结构沿染色体全长分布,其两端都与核膜相接触,由它发育成联会复合体的侧生组分。在偶线期中同源染色体配对,互相靠近的同源染色体的两个侧生组分伸出 L— C纤维,它们以拉链式结构相互锁合,形成宽约 100纳米的中间区,中间区的中心为联会复合体的中央组分。中央组分则是 L— C纤维在中间区锁合的部位。 L— C纤维的锁合在靠近核膜处较早开始,但在同源染色体比较靠近的其他位点上也可能同时锁合。同源染色体间形成联会复合体使它们的配对完成,而且同源染色体的非姊妹染色单体之间进行局部交换和出现交叉。在侧生组分形成之后,如果在偶线期抑制 DNA合成或蛋白质合成,则联会复合体不能形成,将导致同源染色体的配对过程受阻,也不会发生同源染色体的交换和交叉。在双线期联会复合体解体。

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分泌(secretion)

  细胞内的分子排出或挤出到周围介质中。分泌物包括离子、酶、激素、糖蛋白、液体、无机盐等。分泌的主要形式如下。   局部分泌(merocrine) 或称外分泌(exocrine),为最普遍的胞吐方式。其分泌物为小的包以膜的颗粒与质膜融合后而排出的复杂过程。如消化酶原颗粒的分泌过程包括:分泌物所需物质从微血管运送至腺细胞基部线粒体之间;线粒体为三磷酸腺苷生成提供能量,三磷酸腺苷获取的能量用于合成有机物;有机物在内质网合成,其上的核蛋白体在蛋白合成中起主要作用,成为酶前体进入内质网腔;含酶蛋白前体的内质网以出芽方式与其相脱离,成为运输小泡至高尔基体的囊泡内,小泡浓缩,脱离高尔基体分泌而形成大泡,以酶原颗粒形式排至细胞质中;酶原颗粒与质膜接触、融合、破裂后排至腺泡腔。神经介质也是从神经末梢以胞吐方式释放的。   顶端分泌 (apocrine) 在释放出分泌物和一些细胞内物质时,其胞质顶端的膜一起丢失。此种分泌见于肛门周围的腺体。   全分泌 (holocrine) 在分泌物释放时,包括整个细胞解体,连同分泌物一起排出。如皮脂腺分泌。   一些液体的分

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放线菌(Actinomycete)

   原核生物的一个类群。大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细,宽度近于杆状细菌,约0.5~1微米。可分为:营养菌丝,又称基质菌丝,主要功能是吸收营养物质,有的可产生不同的色素,是菌种鉴定的重要依据;气生菌丝,叠生于营养菌丝上,又称二级菌丝。在气生菌丝上分化出可产生孢子的孢子丝,孢子丝的形状和排列方式因种而异。成熟的孢子丝上产生成串的分生孢子。孢子的表面结构、形状及颜色在一定条件下比较稳定,是鉴定菌种的重要依据。以无性孢子和菌体断裂方式繁殖。绝大多数为异养型需氧菌。有的种类可在高温下分解纤维素等复杂的有机质。在自然界分布很广,绝大多数为腐生,少数寄生。产生种类繁多的抗生素,据估计,已发现的4000多种抗生素中,有2/3是放线菌产生的。与人类关系十分密切。重要的属有:链霉菌属,小单孢菌属和诺卡氏菌属等。   链霉菌属 (Streptomyces)是最高等的放线菌。有发育良好的分枝菌丝,菌丝无横隔,分化为营养菌丝、气生菌丝、65孢子丝。孢子丝再形成分生孢子。孢子丝和孢子的形态、颜色因种而异,是分种的主要识别性状之一。已报道的有千余种,主要分布于土壤中。已知放线菌所产抗生素的9

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翻译(translation)

  蛋白质生物合成过程。生物都有从氨基酸合成自身蛋白质的能力,此过程在核糖体上进行,信使 RNA ( mRNA )是合成的模板。生物依照 mRNA 的密码子序列,通过转移 RNA ( tRNA )的反密码子与密码子配对,使相应的氨基酸从 N 端到 C 端依次参入蛋白质。这个过程十分复杂,有几百种生物分子参与。以原核细胞为例,大体可分为两个阶段:   氨酰 tRNA 合成酶识别特定的氨基酸及对应于该氨基酸的 tRNA ,并催化氨酰 tRNA 的合成,反应伴有 ATP 的水解。   mRNA 翻译成蛋白质 原核细胞的起始氨酰 tR-NA 是甲酰甲硫氨酰 tRNA ( fMet-tRNA fMet )。先是蛋白质起始因子、 GTP 、 mRNA 、核糖体等结合成 70S 起始复合物,待起始因子先后从核糖体脱离后, fMet-tRNAfMet 结合到核糖体 50S 亚基上的肽酰位( P 位),并与 mRNA 上的起始密码子 AUG 配对,这使翻译从 mRNA 上的正确起始点开始。新的氨酰 -tRNA 在延长因子和 GTP 的作用下结合

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高尔基体(Golgi apparatus,Golgi complex)

   亦称高尔基复合体、高尔基器。是真核细胞中内膜系统的组成之一。为意大利细胞学家高尔基Golgi于1898年首次用银染方法在神经细胞中发现。是由光面膜组成的囊泡系统,它由扁平膜囊(saccules)、大囊泡(vacuoles)、小囊泡(vesicles)三个基本成分组成。扁平膜囊是一扁平囊状结构,囊腔中央较窄,周边较宽,它们平行排列类似扁盘堆叠结构,形成扁平膜囊堆,亦称高尔基堆(Golgi stack)。动植物细胞高尔基体中的扁平膜囊数依细胞类型与功能而异,一般为3~10个。高尔基体的主体部分由扁平膜囊堆构成,排列成弓形、半球形或球形。通常显示具极性,有凸面和四面,膜囊堆凸出面称为形成面,又称顺面或非成熟面;四面称为分泌面,又称反面或成熟面。在扁平膜囊堆周围有许多小囊泡,直径约为40~80毫微米。它们较多集中于形成面,靠近内质网的一侧。一般认为小囊泡是由附近内质网芽生而来,其功能可能是将内质网合成的蛋白质运送到高尔基体。大囊泡多见于分泌面,通常认为是由扁平膜囊末端膨大而成,是高尔基体的分泌产物。接近形成面的扁平膜囊膜在形态和染色性质上与内质

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核仁(nucleolus)

   真核细胞核内无界膜包围的球状小体。通常有1~2个,也有多个。核仁大小与数目因生物种类的生理状态不同而异。光镜下观察核仁为匀质球体,电镜观察其亚显微结构,有三个特征性区域:(1)颗粒区(granular component),内含电子密度较大的颗粒,直径为150~200埃(),是处于不同成熟阶段的核糖体亚单位的前体;(2)纤维区(fibrillar component),由直径50~100埃的细微纤维组成,可能是核糖体RNA(rRNA)转录本和核糖核蛋白(RNP);(3)核仁染色质或浅染色区,该区含有从染色体核仁组织区引伸进入的DNA,内含rRNA基因。颗粒区和纤维区可被核糖核酸酶和一些蛋白酶水解,表明这两部分结构主要由核糖核蛋白组成。在细胞周期进展过程中,核仁进行着分离和重新聚合过程。核仁的再次出现与一些特殊染色体上存在的核仁组织区(NOR)密切相关。核仁是核糖体RNA(rRNA)合成(包含转录、加工、成熟过程)和组装核糖体亚单位前体的工厂。在核仁中rRNA前体的加工成熟过程是以核蛋白方式进行的。rRNA前体(45SrRNA)被包装在大的核糖核蛋白颗粒中,经过多次切割加

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核糖体(ribosome)

   亦称核蛋白体、核糖核蛋白体。是普遍存在于各类细胞中的无被膜的颗粒结构,为细胞合成蛋白质的重要场所。除存在于细胞质(游离态)、线粒体和叶绿体中外,也结合排列在内质网膜和核膜外表面上,后者主要合成向细胞外输送的分泌蛋白和装配内膜系统之蛋白。核糖体直径约15~30毫微米,包含大、小两个亚单位,大、小两亚单位间有一个被称为隧道的间隙,其中有信使核糖核酸(mRNA)细丝通过。原核细胞核糖体沉降系数为70S,大、小亚单位分别为50S和30S;真核细胞核糖体沉降系数为80S,大、小亚单位分别为60S和40S。核糖体的化学成分主要是蛋白质和核糖体RNA(rRNA),真核生物大亚单位含28S、5S、5.8SrRNA和50余种蛋白质;小亚单位含18SrRNA和30余种蛋白质;原核生物大亚单位含23S、5SrRNA和30余种蛋白质,小亚单位含16SrRNA和20余种蛋白质。合成蛋白质时通常是由一条mRNA链将多个核糖体串联在一起,以多聚核糖体(polyribosome)形式进行。核糖体上存在有与mR-NA、氨酰基-tRNA(转移核糖核酸)、肽基-tRNA、起始因子、延长因子、释放因子及多种酶

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核糖核酸聚合酶(RNA polymerase)

   催化RNA合成的酶。主要指DNA指导的RNA聚合酶,即以DNA为模板,以4种核苷三磷酸(ATP,GTP,CTP和UTP)为底物,从5′到3′合成RNA的酶。其催化方式与DNA聚合酶相似,但不具备有校正作用的外切核酸酶活性,聚合反应也不需引物。   对大肠杆菌RNA聚合酶了解得最多。这种酶含有多个亚基,全酶结构为α2 ββ′σ。   σ亚基易从全酶上脱落下来,剩下的α2 ββ′部分称核心酶,有催化活性。σ在选择正确的DNA模板链并引导RNA聚合酶在RNA链合成起始的合适部位(启动子部位)与模板结合起着重要的作用。在核心酶中加入σ可使酶和非启动子部位的亲和力减少约104 倍,因而增加它与启动子部位结合的专一性。其他原核生物的RNA聚合酶在亚基大小和组成上明显相似,一些病毒(如大肠杆菌T7噬菌体)的RNA聚合酶则完全不同。原核生物中主要的RNA都是由同一种RNA聚合酶催化合成的。已在真核生物中发现3种RNA聚合酶,分别催化各种RNA的合成。这些酶也是多亚基复合物,一般含两个较大的亚基(分子量~140000和~200000)和几个小亚基,其

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