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染色体的显带技术

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一、实验目的
1、了解染色体显带技术的发展与基本知识;
2、掌握染色体C带技术。
二、实验原理
    所谓染色体显带技术指借助特殊的处理后,再用染料对染色体进行分化染色,使其呈现特定带纹的一种细胞遗传学技术。如C带、G带等。显带处理后,染色体上带纹的数目、位置、宽窄与染色的深浅具有相对的稳定性与一定的种属特异性。它为不同物种之间的进化关系的研究提供了一个有效手段。C带是特异的显示结构异染色质的带,它专一地显示着丝粒区域的结构异染色质。
三、实验材料
实验五与实验二制备的染色体玻片标本若干片
四、器具及药品
    显微镜,电子天平,恒温 水浴 锅,玻片架,解剖器,染色缸,白瓷板,氢氧化钡,盐酸,氯化钠,柠檬酸钠,吉姆萨,磷酸缓冲液。
五、实验步骤
㈠BSG法显示C带
1、将3-7天的实验5染色体制片放入0.2mol/l的盐酸中处理1小时。
2、蒸馏水冲洗后,转入50℃的5%的氢氧化钡溶液中5-15分钟。时间由经验得来。
3、同温蒸馏水冲洗,直至氢氧化钡冲净为止,如果冲不净,可放入0.2mol/l的盐酸中2秒钟,再用蒸馏水冲洗干净,晾干。或连同染色缸放在自来水下冲洗,直至氢氧化钡溶液冲洗干净,因钡遇空气易形成不溶于水的碳酸钡膜,污染制片,使染色体无法显带。换入蒸馏水,每隔4-5分钟换水一次,重复3次左右。
4、转入60℃的2×SSC溶液中恒温 水浴 1小时,同温 蒸馏 水冲洗,自然干燥。
5、染色
   10%Giemsa液(PH=6.8)扣染1hr, 蒸馏 水冲洗。
6、镜检
7、拍照
㈡HSG法显示C带
1、将3-7天的实验5染色体制片放入0.2mol/l的盐酸中处理1小时。
2、蒸馏水冲洗后,转入60℃的2×SSC溶液中恒温水浴1小时,同温蒸馏水冲洗,自然干燥。
3、染色
   10%Giemsa液(PH=6.8)扣染1hr,蒸馏水冲洗。
4、镜检
5、拍照
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