染色体的显带技术

一、实验目的
1、了解染色体显带技术的发展与基本知识；
2、掌握染色体C带技术。
二、实验原理
    所谓染色体显带技术指借助特殊的处理后，再用染料对染色体进行分化染色，使其呈现特定带纹的一种细胞遗传学技术。如C带、G带等。显带处理后，染色体上带纹的数目、位置、宽窄与染色的深浅具有相对的稳定性与一定的种属特异性。它为不同物种之间的进化关系的研究提供了一个有效手段。C带是特异的显示结构异染色质的带，它专一地显示着丝粒区域的结构异染色质。
三、实验材料
实验五与实验二制备的染色体玻片标本若干片
四、器具及药品
    显微镜，电子天平，恒温 水浴 锅，玻片架，解剖器，染色缸，白瓷板，氢氧化钡，盐酸，氯化钠，柠檬酸钠，吉姆萨，磷酸缓冲液。
五、实验步骤
㈠BSG法显示C带
1、将3-7天的实验5染色体制片放入0.2mol/l的盐酸中处理1小时。
2、蒸馏水冲洗后，转入50℃的5％的氢氧化钡溶液中5-15分钟。时间由经验得来。
3、同温蒸馏水冲洗，直至氢氧化钡冲净为止，如果冲不净，可放入0.2mol/l的盐酸中2秒钟，再用蒸馏水冲洗干净，晾干。或连同染色缸放在自来水下冲洗，直至氢氧化钡溶液冲洗干净，因钡遇空气易形成不溶于水的碳酸钡膜，污染制片，使染色体无法显带。换入蒸馏水，每隔4-5分钟换水一次，重复3次左右。
4、转入60℃的2×SSC溶液中恒温 水浴 1小时，同温 蒸馏 水冲洗，自然干燥。
5、染色
   10％Giemsa液（PH＝6.8）扣染1hr， 蒸馏 水冲洗。
6、镜检
7、拍照
㈡HSG法显示C带
1、将3-7天的实验5染色体制片放入0.2mol/l的盐酸中处理1小时。
2、蒸馏水冲洗后，转入60℃的2×SSC溶液中恒温水浴1小时，同温蒸馏水冲洗，自然干燥。
3、染色
   10％Giemsa液（PH＝6.8）扣染1hr，蒸馏水冲洗。
4、镜检
5、拍照