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实验方法
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问
求教流式细胞仪通道选择?
loveliufudan
以下是一种可能的通道选择: • FSC (Forward Scatter):用于测量细胞的大小。 • SSC (Side Scatter):用于测量细胞的复杂性或内部结构。 • FITC:用于检测annexin ftc的荧光信号。 • PE:用于检测PI的荧光信号。根据您提供的通道配置选项,您可以选择FSC、SSC、FITC和PE通道进行测量。其他通道选项可能适用于您的实验,具体取决于您的需求和其
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问
关于BMDC流式鉴别
loveliufudan
你提到的实验方案基本上是可行的,可以用于鉴定骨髓来源的树突细胞。你选择了一系列抗体来标记树突细胞的特定表面标志物,这可以帮助你识别和分析这些细胞。你选择的抗体组合如下: 1. APC/Cyanine7 anti-mouse CD11c抗体 - 用于标记CD11c表面标志物,这是树突细胞的常见标记物。 2. APC/Cyanine7 Armenian Hamster IgG同型对照抗体 - 用于作为
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问
流式细胞仪器如何调整补偿,关于这方便有什么参考的文献或者书籍吗?
elabscience
补偿基本方法同下图,更多内容可以直接查看流式细胞术相关书籍。
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问
流式测凋亡方法的区别?
balalaLy
tunel法容易有假阳性,做免疫荧光比较多,另外两个做流式比较多
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问
流式实验细胞凋亡,周期的结果分析
北风未起
ModFit LT与CELLQuest 软件均可分析细胞凋亡,ModFit LT软件更客观、准确
3 回答
411 围观
问
流式咨询:细胞染色后来不及做怎么处理
huarenqiang5
如果短时间保存,可以放在4℃进行保存。
3 回答
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问
怎么有针对性的选择流式抗体?
juyue2010
根据实验,确定好marker,从文献中查找相应的货号
3 回答
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问
请问流式细胞术实验结果与预期结果相反,该怎么排查原因?
和光同尘戢鳞潜翼
看一下Gate有没有错误。圈门对于流式结果非常重要,还有就是电压与补偿。
3 回答
345 围观
问
流式上机不同处理组可以使用空白组的单染模板吗?
土井挞克树
可以只用未加药组来进行单染并调节荧光补偿
3 回答
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问
流式连续表达怎么画门?
txs900416
一般会设置对照组,例如荧光减一组,isotype同型对照组,这样根据这种对照组区分阴性表达的上限,这样可区分连续表达分子的阴性和阳性。
3 回答
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问
流式区分死活细胞
loveliufudan
DAPI和PI都是DNA染料,可以用来区分死活细胞。死细胞的质膜完整性受损,导致DNA染料可以进入细胞核并与DNA结合,发出荧光信号。活细胞的质膜完整性正常,阻止DNA染料进入细胞核,因此不会发出荧光信号。如果你想用DAP或PI区分死活细胞,你应该先进行固定再进行染色。如果你先染色再固定,会导致所有的细胞都发生渗透性增高,结果就是所有的细胞都染上色以至于无法区分死活细胞。如果你需要检测胞内抗原而不
4 回答
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问
流式细胞仪测细胞凋亡求助
loveliufudan
实验组细胞碎片较多的原因可能与诱导细胞凋亡有关。凋亡是一种自身调控的程序性死亡方式,凋亡过程中细胞会发生细胞膜破裂、核染色质凝集和细胞碎片化等一系列特征性变化。因此,在细胞凋亡的过程中,细胞碎片增多是正常现象,但也需要注意是否存在过度凋亡或非程序性细胞死亡等异常情况。同时,实验中使用的药物或其他因素也可能会影响细胞的形态和特征,需要结合实验设计和其他指标综合考虑。建议您对实验组和对照组的样本进行进
3 回答
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问
流式细胞仪
sswei
流式细胞仪操作注意点:1. 因实验需保证待检测样品细胞为单细胞悬液,因此在细胞培养、制备阶段,贴壁细胞需用先用胰酶消化成单个细胞,而后再后收集待测样品细胞;胸腺、脾脏和淋巴结等外周免疫器官,主要由免疫细胞组成,只需直接将脏器经钢网研磨即可制成单细胞悬液;实体脏器肺脏、肝脏和肿瘤组织内含有较多的结缔组织,而实体脏器细胞之间一般结合紧密,所以直接简单的将脏器进行研磨是无法得到理想的单细胞悬液的,因此,
4 回答
371 围观
问
流式上机操作,求教程。
你好几和户
流式细胞仪的使用操作规程...... ①打开电源,对系统进行预热;②打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统;④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度最强,并要求变异系数为最小;⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算
5 回答
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问
在做流式时,如何解决非特异性染色的问题?
秋秋欣欣
降低抗体浓度可以减少非特异性染色
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问
流式细胞术中遇到的问题?
土井挞克树
抗体连没连荧光素,没连荧光素标签就连不上
3 回答
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问
流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?
土井挞克树
信号检测时,每一个细胞通过激光,机器的探头都会检测到一个荧光信号,在内部产生一个电脉冲信号(波),这个信号机器记录为一个峰值,每一个峰值都有三个参数,高度(H),宽度(W)和曲线下面积(A),H 和W都是直接测出的,而A是根据机器的设置就算得出。这三个参数都可以作为流式细胞仪结果图的坐标。比如PI(FL-2,老式的机器用这个来表示荧光通道的数目,一般是1-4)的信号,既可以用PI-H来作图,也可以
1 回答
1903 围观
问
流式细胞周期结果没有S期,是什么原因
笑嘎嘎
如图:
2 回答
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问
求流式检测胞内抗原时打孔液的配方?
你好几和户
加⼊10%Triton X 100,(破膜⽤);加⼊1 mmol/L氯化钙,(问题所在),吹打均匀,孵育1~10min,测定荧光即Fmax值。
4 回答
457 围观
问
小鼠外周血进行流式细胞术鉴定细胞分型,为什么线性图看不到分群但是对数图可以?
此用户已注销
细胞分不开的因素有个人认为有以下因素(1)抗体的特异性不好(2)选的单标不合适,若细胞本身抗原就低表达,若还选择弱荧光的FITC那估计确实难以分开(3)前处理有问题,这点我自己感触很深,因为我刚做流式的时候单标抗体也分不开,后来经过好几次摸索才将细胞分开的,细胞一样,抗体也一样,就是前处理不一样。(4)仪器参数的设置,这个一般操作人员的技术比较高应该不会有多大问题,不过我们一般做的时候都会加一个同
2 回答
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