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请问各位大佬 有没有常见流式实验的上机操作啊,本人最近才接触流式,对于上机这一块很多都不懂。有周期、凋亡的上机操作吗?跪求。
你好几和户
流式细胞仪的使用操作规程...... ①打开电源,对系统进行预热;②打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统;④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度最强,并要求变异系数为最小;⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程;⑥样品测量完毕后,再用去离子水冲洗液流系统;⑦因为实验数据已存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),因此可关闭气体、测量装置,而单独使用计算机进行数据处理;⑧将所需结果打印出来.
bamboopiggy
你先说你用的是什么流式仪,一般公司会给培训,直接联系仪器公司,或平台老师。
府宅
流式细胞术检测细胞周期和凋亡上机操作链接
http://www.dxy.cn/bbs/newweb/pc/post/46536275?sf=1&sr=1
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流式细胞术检测细胞周期和凋亡操作规程,看图片
Eason老歌迷
有的。我们一般用modfit软件处理。打开流式机器,因为PI用氩离子激发荧光,激发光波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图,并用ModFit软件模型分析细胞周期与凋亡细胞比例。然后就是你的结果判读,在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上,凋亡细胞与正常细胞相比,前散射光降低,而侧散射光可高可低,与细胞的类型有关;在分析PI荧光的直方图时,先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片,在PI荧光的直方图上,凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二倍体峰。如以G1/G0期所在位置的荧光强度为1.0,则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为0.45,可用鸡和鲑鱼的红细胞的PI荧光强度做参照标准,两者分别为0.35和0.7,可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。
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