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细胞分不开的因素有个人认为有以下因素(1)抗体的特异性不好(2)选的单标不合适,若细胞本身抗原就低表达,若还选择弱荧光的FITC那估计确实难以分开(3)前处理有问题,这点我自己感触很深,因为我刚做流式的时候单标抗体也分不开,后来经过好几次摸索才将细胞分开的,细胞一样,抗体也一样,就是前处理不一样。(4)仪器参数的设置,这个一般操作人员的技术比较高应该不会有多大问题,不过我们一般做的时候都会加一个同型对照来消除非特异性结合,除非你能确定你的抗体特异性非常有保障,否则还是建议你加个同型对照
Eason老歌迷
线性图的细胞分群不明显有两种可能,一是试剂的问题;二是细胞本身的原因,比如贴壁细胞在消化过程中产生损伤,导致非特异性染色,使得分群不明显。
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