MACS 细胞分选入门指南

一、磁珠标记非 CD4+ 细胞细胞计数细胞悬液 300xg 离心 10min，去上清细胞重悬，每 1×107 细胞 90ul分离缓冲液每 1×107 细胞添加 10ul CD4+ T 细胞生物素-抗体鸡尾酒混匀，于 2-8℃ 中孵育 5min每 1×107 细胞添加 20ul 抗生物素磁珠混匀，于 2-8℃ 中孵育 10min 非 CD4+ 细胞添加分离缓冲液调整溶液体积至 500ul（注：500

使用去死细胞试剂盒能够快速而直接地去除细胞培养物或组织来源细胞悬液中的死细胞。试剂盒包含即用型磁珠和用于磁标记细胞碎片、死细胞和濒死细胞的结合缓冲液。磁标记的物质通过磁分选去除，在 25 分钟内获得高纯度的活细胞。

在肿瘤研究中，使用来自患者的原代肿瘤细胞，能够体现肿瘤细胞系所缺乏的体内肿瘤微环境和原发肿瘤异质性的影响。使用人肿瘤解离试剂盒可以温和、快速、有效地从原发性人肿瘤组织生成单细胞悬液，高得率地获得肿瘤细胞、基质细胞和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL），同时保留细胞表面表位。解离的细胞随后使用人肿瘤细胞分离试剂盒富集 untouched 肿瘤细胞，制备的细胞可进行细胞培养或直接用于生化、生理、药理和形态研究。

B 淋巴细胞的分离是利用 B 细胞多种生物学特性，如 B 细胞表达 CD19、CD20 分子，具有膜免疫球蛋白等，可将 B 细胞与其他细胞进行分离。免疫磁珠法分离 B 淋巴细胞操作简便、快捷，能够在短时间内分选出大量纯度较高的 B 细胞，从而保证细胞活性。

免疫磁珠分选（magnetic cell sorting）细胞是一种高效简便的免疫细胞分离和纯化方法，目前已广泛应用于各种细胞分选，如造血干细胞等的分离和纯化。该法通过免疫细胞表面的抗原与连接着磁珠的特异性抗体相结合，在外加磁场中，与免疫磁珠相结合的免疫细胞被吸附于磁场中，使这些细胞与其他不能结合磁珠的细胞分离。免疫磁珠法分为正选法和负选法：如果磁珠结合的细胞是所要分离获得的细胞，即为正选法；如果

干细胞（stem cells，SC）是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，可以分化成多种功能细胞。骨髓中含有造血干细胞（hematopoieticstem cells，HSC）和基质干细胞（stromal stem cells，SSC）。造血干细胞是指具有自我更新能力并能分化为各种血细胞前体细胞，最终生成各种血细胞成分，包括红细胞、白细胞和血小板的一类干细胞，它们在适当条件下也可以分化

树突状细胞（dendritic cell，DC）是一种贴壁细胞，它在脾脏贴壁细胞中所占的比例小于 1%，细胞轮廓不规则，具有树枝状的突起。DC 不但存在于脾脏等外周淋巴器官中，也存在于外周血中。为了在体外研究 DC 的功能，需要对体内的 DC 细胞（主要是外周血、脾脏、淋巴结）进行分离、纯化。分离纯化 DC 的方法主要有两种：基于细胞物理性状的分离方法（如贴壁法）和基于细胞表面标记的分离方法（如

磁性细胞分选器分离（MACS）法即利用细胞表面标志，达到分离纯化 NK 细胞的目的。分离方式有阳性选择法和阴性选择法两种形式（具体操作参照实验时使用的试剂盒说明书）。