丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
丁香通
专题封面

蛋白纯化实验宝典

69 内容    1002 订阅
收藏订阅
Strep 标签蛋白纯化 protocol
Strep-tag®技术来源于德国IBA Lifesciences 公司。利用Strep-tag®技术,可纯化得到高纯度的Strep标签蛋白,杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌表达系统皆可使用。耐受不同的缓冲条件和添加剂(高盐、洗涤剂、还原剂、金属离子和螯合剂)。标签与配体间高达pM级的亲和力使得其不仅用于重组蛋白的纯化,更适用于蛋白质-蛋白质相互作用分析。
亲和层析实验(AC)
通过生物分子之间的特异性相互作用来分离物质的一种层析方法。包括基于空间结构特异结合的抗原/抗体,酶/底物、底物类似物、抑制剂、激活剂、辅因子,激素/受体,核酸/核酸结合蛋白、互补核酸序列,和基于电子的供体和受体相互作用的金属螯合、嗜硫亲和等。该分离纯化蛋白的方法高效、简单、快速、选择性高。
疏水层析实验(HIC)
蛋白质表面一般有疏水与亲水基团,疏水层析是利用蛋白质表面某一部分具有疏水性,与带有疏水性的载体在高盐浓度时结合。在洗脱时,将盐浓度逐渐降低,因其疏水性不同而逐个地先后被洗脱而纯化,可用于分离其它方法不易纯化的蛋白质。疏水性蛋白质溶解于水溶液中时会发生自我聚集或自身相互作用。这种自我聚集是形成多种生物学相互作用的基础,如蛋白质的折叠、蛋白质-底物间的相互作用及蛋白质,通过细胞膜的跨膜运输。疏水作用层
凝胶过滤层析实验(GFC)
分子筛色谱又称凝胶排阻色谱、凝胶过滤和排阻层析,是 20 展来的一种新型的液相层析分离纯化方法。它的分离基础主要根据物质分子大小不同而进行。分子筛色谱所用的基质我们通常称之为好胶,它是具有立体网状结构且呈珠状的颗粒物质,每个颗粒犹如一个筛子,当将混合物样品加入层析柱进行洗脱时,大分子物质不多孔凝胶基质能进入基质内部而沿颗粒间的空隙随着溶剂流动,由于其流程较短,移动速度快而最先流出柱外;小分子物质则
🔥 离子交换层析实验(IEC)
离子交换层析(IEC)用于蛋白质分离的原理的是基于带相反电荷分子间的相互吸引力,其中蛋白质表面所带的电荷取决于蛋白质 pI 和环境 pH。蛋白质的保留时间和盐浓度决定了其与基质表面相互作用的结合位点数量。一般在低盐浓度时使蛋白质结合,而在高盐浓度时洗脱蛋白质。等度洗脱的洗脱窗口很低,因此通常以线性盐浓度梯度洗脱蛋白质。
提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序